法医药（毒）物分析是研究与法律、法规有关可疑检材中药（毒）物的分离、定性定量分析的法医学分支科学；其研究内容包括从组织和体液中或排泄物及体外检材中分离和纯化毒物及其代谢产物，并对毒物、药物原型及其代谢产物的定性定量分析。用于法医药（毒）物分析的检材数量有限，且一经消耗不可复得，最常采用分析的检材为血液，且有成形的检测方法及相关国内外分析方法报道。然而从甲醛固定后的器官组织中检验药（毒）物的国内外报道甚少；有些案例案发时未涉及药（毒）物分析，当检案需要时，唯一留下的只有甲醛固定后的某些器官和组织。建立一套甲醛固定后人体器官组织中药（毒）物的分离、提取和检验方法，旨在澄清案件事实；为某些相关案例的司法鉴定提供证据；对疑有药（毒）物直接或间接引起伤亡的事件及医疗纠纷提供重要鉴定证据，为侦查破案提供重要线索，为司法审判提供依据。生物检材中的药（毒）物分析，由于其在生物体内代谢，分离和纯化药（毒）物及代谢产物比较复杂，且所含成分量微，基本属于痕迹量药物分析；同时生物基质对定量检测有着很大影响；甲醛固定也必然会影响组织中药（毒）物检测。能否在甲醛固定后的器官组织中分离、提取和纯化药（毒）物及其代谢产物，并对毒物、药物原型及其代谢产物的定性定量分析至关重要。所建立方法的选择性、分离效率、检出量线性范围，准确性及在实际工作中的可行性，适用性和可信程度，及其分析结果在法医学实践中的意义是关键。本研究从法医毒物分析和法医药物分析，两方面在甲醛固定后的器官组织中进行实验研究，并以实际检案辅以论证，阐明甲醛固定一定时间内可以检出某些药（毒）物成分，所建方法准确、实用，<WP=42>适用于法医学鉴定及相关研究。研究成果具有创新性，应用到法医检案实践中有着重要意义。研究目的建立生物器官组织甲醛固定后，所含药（毒）物分离、提取和检测方法，以满足个别只有甲醛固定组织检材案件的药（毒）物检验。为司法鉴定提供有力证据，为维护社会安定、保护公民权益，为法制服务。实验方法根据拟检测的药（毒）物的理化性质及在生物体内代谢过程，制定分离提取方案；采用匀浆去蛋白，有机溶剂振荡分离提取，固相萃取净化，使用高分辨率的检测仪高效液相检测。1、在实验组甲醛固定后豚鼠脏器组织中，通过高氯酸匀浆去蛋白，并在弱酸性条件下使用甲醇振荡提取灭多威成分，然后用固相萃取柱萃取净化；通过Agilent 1100 Pickering 5200高效液相系统，选择235nm检测波长，ZORBAX Eclipse XDB C-18色谱柱（4.6mm×250mm 5）； 流动相 乙晴：甲醇：水（5%:45%:50%），流速1.2ml/min，进样量10l，柱压320bar，室温检测灭多威。2、制造豚鼠利多卡因中毒模型，处死后采取新鲜血液、脏器组织，以及10%甲醛固定后的器官组织；采用滴加10%偏重亚硫酸钠，弱碱性条件下有机溶剂氯仿提取，HPLC分析。仪器：Agilent 1100高效液相色谱仪，色谱柱：ZORBAX 250×46mm OPS柱，流动相：醋酸磷酸盐缓冲液（PH3.5）—甲醇（70%：30%），流速1.2ml/min,检测波长240nm, 进样量10l 。结果1、甲醛固定后的生物组织内检出了氨基甲酸酯类杀虫药灭多威<WP=43>（Methomyl）成分，所建实验方法获得良好的分离效果。在口服100mg·kg–1灭多威中毒死亡的实验组豚鼠组织中检出灭多威含量为：心血—17.9±1.56g·ml–1，新鲜各器官组织—1.89±0.08-2.90±0.18g·g–1，甲醛固定三周脏器组织—1.67±0.17-2.69±0.18g·g–1，甲醛固定五周脏器组织—1.63±0.14-2.64±0.14g· g–1。生物样品最低检测限（LOD）为0.045mg · kg-1； 所测日内、日间RSD%均在4.0%以内；甲醛固定脏器组织内灭多威加样检测绝对回收率为（97.76±0.86）%，相对回收率为（96.92±0.33）%，提取回收率为（94.74±2.88）%。甲醛固定3-5w生物组织内灭多威消除率为%：7.3±2.4-13.9±6.3。2、采用HPLC方法检测新鲜组织及甲醛固定后脏器组织中利多卡因；按利多卡因100mg·kg–1经腹腔注射给豚鼠，其检出量为：心血—19.09±3.95g·ml–1，新鲜脏器组织—2.20±0.58-3.82±0.80g·g–1，甲醛固定三周脏器组织—1.91±0.60-3.30±0.77g·g–1甲醛固定五周脏器组织—1.80±0.57-3.22±0.84g·g–1。实验中最低检测限为0.10g·g-1；在1.0-20.0 g·g-1线性范围内呈良好线性关系；检测日内RSD为1.8%，日间RSD为3.4%。甲醛固定后脏器组织中检测利多卡因，添加样品实验相对回收率为：97.3%-99.1%。甲醛固定3-5w，使其利多卡因检出量下降13.2%-22.9%。采用所建方法，在实际检案中甲醛固定两月内的人体器官组织，相关案例全部检出利多卡因。结论甲醛固定后的人体组织中药（毒）物的分离、提取及检测，可为相关案例司法鉴定提供重要依据。围绕实际检案中的众多案例，我们进行深入研究，开辟了许多甲醛固定后人体组织内药（毒）物检验方法，而且在一<WP=44>些涉毒案件及医疗纠纷中得到了应用，为某些案件的法医学鉴定提供了有效的证据。本研究成功地建立了灭多威和利多卡因含量的测定方法，通过动物实验，优化了检测条件，提高了分离