文蛤多肽的生物提纯及抗肿瘤活性研究

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众所周知,癌症已经成为威胁人类健康的疾病之一,仅次于心血管疾病位居第二。我们知道,传统的肿瘤治疗方法对人体有强大的副作用,寻找合理的方法和高效低毒的药物来预防和治疗癌症的发生是国内外医学界专家研究的热点内容,也是药学界的主流话题。世界上海洋资源无比丰富,物种多样性为抗肿瘤新药的研究提供了物质基础。最近几十年,已经有多种抗肿瘤活性物质被发现并应用于临床中,其中,文蛤用于治疗癌症已经有悠久的历史了。在前人的基础上,本文就文蛤抗肿瘤作用进行了介绍。我们从其体液中分离得到一种新的活性物质,并对其抗肿瘤活性进行了研究。本课题组采用了一系列的生物分离技术,主要有硫酸铵分级沉淀、离子交换层析、疏水层析、凝胶层析等,对文蛤体液进行分离纯化,并得到了一种新的活性物质,对肿瘤具有较好的抑制作用。SDS-PAGE凝胶电泳检测到该多肽的分子量大小为15 KDa,并将其命名为MM-15。用BCA法检测蛋白浓度,采用MTT法检测MM-15对肿瘤细胞株(人肺癌A549、人肝癌BEL-7402、人结直肠癌HCT-116、人卵巢癌HeLa细胞、人胰腺癌Aspc-1)和正常细胞株(乳腺细胞MCF-10A和小鼠胚胎成纤维细胞NIH 3T3)的生长抑制活性。按照上述排列顺序,MM-15对上述细胞株的IC50值依次为31.80μg/mL、47.75μg/mL、64.3μg/mL、46.00μg/mL、45.13μg/mL、149.51μg/mL和123.13μg/mL。研究结果表明,MM-15具有广谱抗肿瘤活性,其中对人肺癌A549的抑制效果最好,而对于两种正常细胞无明显作用。后续以人肺癌细胞A549作为研究对象,探究了MM-15的浓度及作用时间对肿瘤细胞增殖的影响。结果表明,随着MM-15浓度的增加对A549细胞抑制作用也逐渐增强,IC50为30.30μg/mL;MM-15作用于A549两天后效果达到最佳,且药效可持续至三天以上。对于文蛤多肽MM-15抗肿瘤活性的研究,为其抗肿瘤机制研究及基因重组改造奠定了物质基础,也为恶性肿瘤的治疗开辟了新的途径,具有广阔的发展前景。
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