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目的:探讨蜕皮甾酮体外降糖的作用特点或机制,即能否通过刺激胰岛素分泌或直接作用于肝细胞增加胰岛素敏感性而产生降糖作用。 方法: 检测 HepG2 细胞 24 小时培养液中葡萄糖的消耗量;另外测定βTC3 细胞胰岛素的释放量。 结果:蜕皮甾酮在 1×10-6~10-4M 浓度范围内可使 HepG2 细胞的葡萄糖消耗量显著增加(44~77%);蜕皮甾酮的降糖效能随着培养液中葡萄糖浓度的升高而降低;胰岛素对蜕皮甾酮的降糖作用没有明显的影响。蜕皮甾酮没有刺激βTC3 细胞胰岛素分泌的作用。 结论:蜕皮甾酮可通过肝细胞发挥非胰岛素依赖的降糖作用,但不能刺激胰岛素的分泌。 目的:采用高胰岛素体外诱导培养 HepG2 细胞,建立胰岛素抵抗的细胞模型。 方法:将 HepG2 细胞置于 5×10-7mol/L 胰岛素培养液中 16h,采用3H-D-葡萄糖掺入试验及残余 125I-胰岛素结合率测定等方法观察高胰岛素对 HepG2 细胞葡萄糖摄取率及其胰岛素受体数目和功能的影响。光、电镜观察新建细胞系的形态学特点。 结果:高胰岛素诱导培养的 HepG2 细胞葡萄糖掺入率及残余 125I-胰岛素结合率明显低于未用高胰岛素诱导的 HepG2 细胞(对照细胞)。将高胰岛素诱导培养的 HepG2 细胞置于不含胰岛素的培养液中 60h,其细胞葡萄糖摄取率仍明显低于对照细胞。高胰岛素诱导培养的 HepG2细胞系在形态学上与对照细胞无明显差别。 结论:将 HepG2 置于 5×10-7mol/L 胰岛素环境中 16h,该细胞对胰岛素的生物学效应产生抵抗,其胰岛素抵抗状态可维持 60 小时。该方法较为简便、易行、重复性好、成功率高,可广泛用于胰岛素抵抗的研究。 目的:应用高胰岛素体外诱导培养建立的胰岛素抵抗 HepG2 细胞模型探讨蜕皮甾酮对其胰岛素敏感性和糖代谢的影响。 方法:采用 3H-D-葡萄糖的掺入试验评价细胞的胰岛素敏感性,在诱导胰岛素抵抗 HepG2 细胞模型的过程中或模型建立后,培养液中加入蜕皮甾酮及吡格列酮共同孵育,观察蜕皮甾酮及吡格列酮对 HepG2细胞葡萄糖掺入率,同时观察蜕皮甾酮对胰岛素抵抗细胞模型葡萄糖消耗量的影响。