灰树花质量控制关键技术与质量评价体系研究

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目的:本研究以中医药理论为指导,采用现代科技手段,系统地对灰树花的国内外文献综述、生药学研究、定性定量分析、指纹图谱构建诸方面进行认真研究,旨在探索灰树花质量控制关键技术,建立科学、稳定、可控的质量评价体系,为灰树花的临床用药、资源开发以及打入国际市场奠定基础。方法:运用生药学技术、薄层色谱法(TLC)、紫外光谱法(UV)、聚丙烯酰胺凝胶电泳技术(PAGE)、高效液相色谱法(HPLC)等多种现代分析技术对灰树花质量控制评价标准进行了系统的研究。应用生药学技术,对灰树花进行了资源考证、样品鉴定、性状鉴别、显微鉴别等研究。利用TLC建立灰树花氨基酸类成分薄层色谱和全息薄层色谱。采用经典的蒽酮-硫酸法、考马斯亮蓝法、HPLC,测定灰树花活性成分多糖、蛋白质和麦角甾醇的含量。采用UV、PAGE、HPLC,构建灰树花紫外谱线组法图谱、蛋白电泳指纹图谱,HPLC指纹图谱,分析与其质量相关的影响因素。结果:1.通过生药学鉴别,考察灰树花来源、产地、规格、性状与显微等特征。2.利用薄层色谱技术对灰树花进行氨基酸类成分专属性鉴别。首次采用全息薄层色谱技术,弥补了国内外通过TLC分析灰树花的不足。3.不同产地、不同规格灰树花的主要活性成分多糖、蛋白质的含量差异明显,分析影响因素,拟定活性成分含量限度。4.首次采用HPLC对灰树花麦角甾醇进行含量测定,更加完善灰树花质量控制标准。5.考察灰树花水分、灰分、浸出物等方面的含量差异,为进一步研究灰树花有效成分提供指导性建议。6.分析灰树花紫外谱线组法图谱的共有特征峰,达到快速整体鉴别的目的。7.初步构建灰树花蛋白质电泳指纹图谱,从分子水平探索分析不同规格灰树花的遗传多样性。8.创新性地构建灰树花HPLC指纹图谱,标定了麦角甾醇对照峰和共有特征峰,为灰树花质量控制提供了科学的方法和依据。结论:从多指标、多层次、多角度建立灰树花质量评价体系,为保障灰树花质量提供了科学的方法和依据,为中药质量控制标准的发展作出了积极贡献。
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