残粒脂蛋白激活过氧化物酶体增殖物激活受体γ诱导人脂肪间充质干细胞成脂分化

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背景高甘油三酯血症与肥胖密切相关。肥胖患者血浆中残粒脂蛋白(Remnant-like particles,RLPs)显著增多。残粒脂蛋白可诱导大鼠脂肪间充质干细胞(Adipose-derived mesenchymal stem cells,ADSCs)分化为脂肪细胞。过氧化物酶体增殖物激活受体γ(peroxisome proliferators-activated receptor y,PPARy)是成脂分化的关键转录调节因子之一,能够上调脂联素等脂肪因子的表达。推测残粒脂蛋白可通过激活PPARy诱导人ADSCs的成脂分化。目的观察残粒脂蛋白对人ADSCs成脂分化以及PPARy和脂联素表达的影响。方法胶原酶消化法分离人ADSCs,DMEM/F12培养基进行体外培养。流式细胞仪检测细胞表型。标准诱导剂(含胰岛素、地塞米松、3-异丁基-1-甲基黄嘌呤)刺激ADSCs后,光镜下观察细胞形态的变化,油红O染色鉴定脂肪细胞。以单纯10μg/mL胰岛素刺激ADSCs为对照组,以不同浓度的残粒脂蛋白(50、100、150、200μg/mL)与10μg/mL胰岛素刺激ADSCs,油红O染色观察细胞内脂滴形成情况,RT-PCR检测PPARy和脂联素的表达。结果梭形ADSCs在体外呈成纤维细胞样生长,传代后可以稳定地分裂增殖。流式细胞仪检测细胞表面抗原CD105的表达率为53.43±2.24%,CD31、CD34、KDR表达均不足10%,分别为8.71±0.57%、4.39±0.94%、1.89±0.05%。在给予标准诱导剂刺激后,ADSCs胞体变大、变圆,细胞内出现脂滴,油红O染色证明其分化为成熟的脂肪细胞。残粒脂蛋白孵育ADSCs12天后,油红O染色发现对照组及50μg/mL残粒脂蛋白组有微量脂滴形成。随着残粒脂蛋白浓度的增加,100~200μg/mL残粒脂蛋白组的红色脂滴逐渐增加,以200μg/mL残粒脂蛋白组的红色脂滴最多。接受残粒脂蛋白刺激的各组ADSCs可检测到不同程度的PPARy和脂联素mRNA的表达。结论残粒脂蛋白通过激活PPARy诱导人ADSCs的成脂分化,并上调脂联素mRNA的表达。
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