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近年来,人们对血脑屏障(blood-brain barrier,BBB)内皮细胞间紧密连接(tight junction,TJ)进行了广泛的研究,发现TJ是由多种蛋白质共同构成的结构复杂,功能多样的复合体。TJ不仅能够封闭脑血管内皮细胞间隙,参与构成血脑屏障,而且还与细胞内信号传导以及细胞的生长分化有关。并且在多种神经系统疾病过程中,都发现有TJ的变化。因此,加强对TJ的研究可以帮助我们更好的理解TJ的功能,了解其在神经系统疾病发生发展过程中的作用,以便为更好地治疗神经系统疾病打下一定的基础。同型半胱氨酸(homocysteine,Hcy)被认为是脑血管疾病的一项独立危险因素,能够对脑血管内皮细胞造成一定的损伤,引起脑血管内皮细胞功能障碍等病理损害。但是Hcy能否对脑血管内皮细胞间TJ造成一定的损伤,至今还未见相关报道。本课题对此进行了初步研究,发现Hcy对脑血管内皮细胞间TJ具有一定的损伤作用。 目的:①实验一:构建脑血管内皮细胞间TJ的模型,为进一步研究Hcy对TJ的影响打下基础。②实验二:观察Hcy对内皮细胞生长情况的影响,以及观察Hcy对内皮细胞间TJ损伤的形态学变化。③实验三:检测Hcy对TJ蛋白Occludin表达的影响。 方法:①培养脐静脉内皮细胞(Human umblilical vein endothelial cell,HUVEC),待其生长至相互接触融合成铺路石状,使用透射电镜观察细胞