人乳头瘤病毒(Humanpapillomavirus,HPV)，能够引起人类皮肤或粘膜形成多种良性疣甚至诱发产生恶性肿瘤，尤其是某些类型的HPV病毒，例如HPV16、HPV18可以引起人宫颈癌(humancervicalcarcinoma)，这种恶性肿瘤的死亡率排在妇女恶性肿瘤的第二位。最近的研究还发现，HPV感染与其他的很多器官的肿瘤发生有一定关系。因此，针对HPV的疫苗研究无论在理论上和临床上都具有很重要的意义!本实验的主要目的是设计HPVl6的疫苗并评价其作用。实验主要分成三个方面：1、16型人乳头瘤病毒的融合蛋白疫苗研究。在这个研究过程中，将HPV16主要的具有转化活性的早期表达蛋白E7上的一个多肽片段(aa38-61)作为一部分，用小鼠IgG2a的重链不变区(heavychainconstantregion，HCCR)作为另一部分构建成融合蛋白，在E.coli中表达，表达的融合蛋白以包涵体的形式存在，经过亲和纯化后进行免疫实验。采用雌性C57BL/6小鼠作为实验动物。结果发现，融合蛋白免疫不仅能够引起小鼠明显的体液和细胞免疫反应，而且对特定肿瘤细胞(TC-1)的入侵也能起到保护的作用，在一些实验中甚至可以使肿瘤消退。2、16型人乳头瘤病毒的核酸疫苗研究。将16型人乳头瘤病毒的E6基因和E7基因进行重组，构建入真核表达载体pcDNA3.1+，得到了能够在真核细胞中表达的核酸疫苗。通过软琼脂集落形成实验，没有发现重组的DNA具有转化活性。用这种核酸疫苗免疫实验动物发现，它能够有效地引起细胞免疫反应，但引起的体液免疫反应水平比较低。在保护及清除肿瘤细胞入侵的实验中，核酸疫苗也显示了良好的效果。3、16型乳头瘤病毒的“假病毒”疫苗研究。在前面两种研究的基础上，又进一步设计了“假病毒”疫苗。“假病毒”疫苗由病毒样颗粒外壳(virus-likeparticles，VLPs)和包裹在里面的核酸疫苗组成，在结构上和天然病毒类似，能够模拟病毒的整个侵染过程。但由于“假病毒”内包裹的是真核表达载体而不是病毒的基因组，所以不会引起病理反应。从我们已经得到的结果来看，“假病毒”可以引发体液及细胞免疫反应。 从得到的实验结果来看，设计的HPV16疫苗可以有效的诱导小鼠产生体液和细胞免疫反应，并能够帮助小鼠抵御肿瘤细胞的入侵，甚至还可以使部分小鼠已经生长的肿瘤减小或消退，可见设计的疫苗是有效的。动物实验的结果也为进一步设计可用于人体的疫苗打下了基础。