漆酶是一种含铜的多酚氧化酶,具有底物广泛、催化效率高的优点,因此在生物制浆、食品加工、废水处理以及环境监测等方面的应用备受关注。然而,漆酶成本高、难以回收利用的缺点制约了其在实际中的应用。酶固定化技术,为降低漆酶的使用成本、实现循环利用提供了一种有效的途径。为寻求一种廉价高效的漆酶固定化方法,以树脂D380为载体、戊二醛为交联剂,结合吸附法和交联法固定真菌漆酶,并研究固定化漆酶的性质。最优固定化条件:1g载体在20ml0.7%的戊二醛溶液中交联2h后,加入2ml稀释酶液和5mlpH为4的醋酸-醋酸钠缓冲溶液,在25℃下吸附反应6h,最终获得的酶活回收率为65.94%。固定化漆酶的最适温度为20℃,最适pH为4,在4℃下保存14天仍保持约80%的酶活力。自由漆酶和固定化漆酶的Km值分别为1.207mmol·L-1和1.616mmol·L-1,说明固定后漆酶对底物的亲和力有所下降。纺织、印染等工业的迅速发展,使染料废水处理成为一个世界性的难题。在自然条件下,染料造成的污染很难被消除,用常规的物理、化学和生物法还是难以达到去除的目的。生物酶法处理废水具有安全、清洁、高效等优点,成为近年来关注的热点之一。由于能够降解多种酚类化合物,漆酶在废水处理中的应用具有很大价值。利用树脂D380固定化的真菌漆酶对染料铬蓝黑R进行脱色条件的探讨,考察常温下酶用量、反应时间和pH值对脱色率的影响。结果显示:在酶用量0.5g,反应时间40min,pH值为5的条件下,固定化漆酶对铬蓝黑R的脱色率可达96.85%。重复利用固定化漆酶处理铬蓝黑R,第8次使用后脱色率仍在94%以上。