【摘 要】
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本研究旨在将RNA干扰技术与基因治疗相结合,探讨腺病毒介导的GLI1siRNA在胰腺癌治疗中的作用。首先通过逆转录多聚酶链式反应检测五株人胰腺癌细胞中GLI1、PTCH1基因的表达;
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本研究旨在将RNA干扰技术与基因治疗相结合,探讨腺病毒介导的GLI1siRNA在胰腺癌治疗中的作用。首先通过逆转录多聚酶链式反应检测五株人胰腺癌细胞中GLI1、PTCH1基因的表达;接着将完整的GLI1siRNA表达框架插入腺病毒穿梭质粒,与BJ5183-AdEasy-1同源重组后转染293细胞,获得表达GLI1siRNA的重组腺病毒Ad-U6-GLI1siRNA;然后通过定量多聚酶链式反应和免疫印迹检测GLI1siRNA腺病毒对胰腺癌细胞GLI1基因及蛋白表达的影响,通过MTT及流式细胞术检测其对胰腺癌细胞增殖及凋亡的影响;最后通过建立裸鼠胰腺癌皮下移植瘤,进一步观察GLI1siRNA腺病毒对胰腺癌的体内治疗效果。本研究发现五株人胰腺癌细胞均表达不同程度GLI1和PTCH1;GLI1siRNA腺病毒能有效地抑制胰腺癌细胞GLI1基因及蛋白的表达;在体内外均有效地抑制胰腺癌的生长,治疗适应症广,疗效好,毒副反应少,具有良好的应用前景。
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