基于低场核磁共振技术的阿胶质量评价研究

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目的:利用低场核磁共振(LF-NMR)技术对不同品牌阿胶及掺假阿胶进行快速检测,并结合化学计量法处理数据,以期建立一种科学、完整、快速的阿胶质量检测方法对阿胶的质量进行评价。方法:(1)采用低场核磁共振仪结合主成分分析法对不同品牌阿胶及同一品牌不同批次阿胶进行快速检测分析。(2)利用3个不同品牌的阿胶进行掺假实验,并通过LF-NMR技术进行快速检测,结合主成分分析法(PCA)和逐步判别分析法(Step-LDA)对其检测数据进行处理,找出可行的分析方法。(3)利用LF-NMR技术研究了不同品牌阿胶中常见掺假物质的检测下限。(4)优化阿胶水解条件,并采用ELSD-HPLC法对不同批次阿胶、未加辅料阿胶汁及黄明胶中四种未衍生化氨基酸进行对比分析,并通过方法学验证。结果:(1)利用LF-NMR技术结合PCA反应出7个不同品牌阿胶(即东阿阿胶、福牌阿胶、宏济堂阿胶、同仁堂阿胶、太极阿胶、华信阿胶、四方阿胶)的品质特性差异,实现了对不同品牌阿胶的区分、辨识。在此基础上利用LF-NMR技术考察了东阿、福牌、宏济堂三个品牌阿胶企业中不同批次间阿胶的品质差异,结果表明不同批次间阿胶质量差别甚微,说明被测品牌的阿胶产品质量较为稳定。(2)LF-NMR技术结合PCA可以有效的反映出纯阿胶及不同形式掺假阿胶的品质特性差异,从而实现对掺假阿胶与纯阿胶间的辨识,同时不同掺假比例的阿胶间也能得到基本区分;利用Step-LDA构建的判别模型对纯阿胶与不同形式掺假阿胶的区分情况更为显著,同类数据集中,类间区分也更明显,不同比例的掺假阿胶在得分图上呈规律性分布,且无重叠现象。交叉验证结果表明,构建的Step-LDA判别模型辨别能力较优,不仅能实现掺假阿胶快速检测的目的,还可以表征不同掺假比例对阿胶质量变化的影响。(3)LF-NMR技术结合PCA得出三个不同品牌阿胶各个掺假物质的检测限分别为:福牌阿胶:黄明胶9%~13%,新阿胶7%~11%,劣质胶5%~9%;东阿阿胶:黄明胶5%~9%,新阿胶13%~15%,劣质胶5%~7%;宏济堂阿胶:黄明胶7%~11%,新阿胶11%~13%,劣质胶5%~9%。采用逐步判别分析(Step-LDA)建立得分模型,并对掺假阿胶样品进行判定,得出三个不同品牌阿胶各个掺假物质的检测限为:福牌阿胶:黄明胶7%~11%,新阿胶9%~13%,劣质胶3%~5%;东阿阿胶:黄明胶5%~9%,新阿胶9%~13%,劣质胶3%~5%;宏济堂阿胶:黄明胶7%~9%,新阿胶7%~9%,劣质胶5%~7%。(4)HPLC-ELSD法分析测定4种主要未衍生化氨基酸的含量,结果表明,9批阿胶中L-甘氨酸、L-羟脯氨酸、L-丙氨酸和L-脯氨酸的含量范围分别为20.58%~23.82%,9.55%~11.60%,8.05%~9.35%和11.12%~13.55%,9批阿胶汁中L-甘氨酸的含量范围为26.25%~28.23%,L-羟脯氨酸为12.93%~13.31%,L-丙氨酸为11.38%~11.05%,L-脯氨酸为15.86%~16.21%,10批黄明胶中L-甘氨酸的含量范围为24.03%~26.31%,L-羟脯氨酸为11.86%~13.15%,丙氨酸为9.08%~10.58%,L-脯氨酸为14.06%~16.10%。三种明胶中4种主要氨基酸含量均能达到2015版《中国药典》规定的标准,且阿胶汁中含量最高,黄明胶次之,阿胶含量最低,可作为区分不同胶类的内在质量指标。结论:采用LF-NMR技术首次对动物药阿胶进行真伪鉴别和质量评价。此方法能保证快速、准确的对动物胶类样品进行核磁共振分析检测,以便了解动物胶类样品的品质,从而快速、准确的鉴别劣质胶,为人们的食用提供质量保证;首次利用HPLC-ELSD法对未加辅料阿胶汁中4种主要氨基酸进行含量测定,并确定其最低限量标准。阿胶汁中去除了辅料对水解后氨基酸含量测定的干扰,结果更为准确,高效,可从源头对阿胶进行质量控制。
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