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背景:阻塞性睡眠呼吸暂停(obstructive sleep apnea,OSA)是临床上较为常见的睡眠呼吸障碍疾病,同时也是许多心血管疾病的危险因素。临床研究显示,OSA与心房颤动(房颤)密切相关,是房颤发生率和复发率增加的重要因素之一。基础研究表明,OSA可显著缩短心房有效不应期,提高房颤易感性,进而诱导房颤的发生;然而目前对于OSA诱导房颤发生的相关机制并不完全清楚。心脏自主神经系统(cardiac autonomic nervous system,CANS)可分为外源性和内源性两部分:外源性CANS包括来自大脑神经核团内的胞体、迷走神经、脊旁神经节链和分布至心脏的节后神经元轴突;内源性CANS则是由位于心脏表面的多个神经节丛(ganglionated plexi,GP)和相互连接的神经和/或神经元共同组成。国外研究者发现,心脏GP(属于内源性CANS)的神经活性在呼吸暂停期间显著增高,且消融GP可显著抑制呼吸暂停所致房颤易感性的升高。此外,我们的前期研究发现,刺激肾交感神经(renal sympathetic nerve,RSN,属于外源性CANS)或者左侧星状神经节(left stellate ganglion,LSG,属于外源性CANS)的高活性状态皆可促进房颤的发生。因此,我们推测,CANS(包括内源性和外源性)在急性OSA所致房颤发生的过程中扮演者重要的角色。目的:1.建立急性OSA所致房颤的动物模型并确定其最佳模型时间;2.探究CANS在急性OSA所致房颤中的作用及其相关机制;3.探讨CANS干预对急性OSA所致房颤的影响。材料与方法:健康的成年雄性杂种犬(体质量为20±4 kg),使用3%戊巴比妥钠(30 mg/kg)静脉注射麻醉后,行气管插管给予持续正压通气。然后分别进行单侧的股动脉和股静脉置管,其中股动脉鞘管连接压力转换器记录血压,股静脉鞘管则连接静脉通道行生理盐水补液。调节室温,维持犬的正常体温。行双侧第四肋间开胸,剪开并悬吊心包,充分暴露心脏。实验期间,全程连接Lead 7000电生理记录系统持续记录和分析电生理信号和血压信号。1.将12只犬随机分为对照(Con)组和OSA组(n=6/组):以呼气末用手术钳夹毕气管插管1.5 min和再通气8.5 min为一个循环的基础上建立急性OSA模型。于基础状态和1 h时抽取动脉血行动脉血气分析以验证急性OSA模型的建立;此外,在基础状态、1 h、2 h及3 h时检测心房、心耳和肺静脉各位点有效不应期和房颤易颤窗口以确定急性OSA所致房颤模型的最佳时间。2.将12只犬随机分为Con组和OSA组(n=6/组):充分暴露心脏左上神经节(superior left ganglionated plexi,SLGP)、LSG及左侧肾交感神经(left renal sympathetic nerve,LRSN)。LSG功能定义为高频电刺激LSG引起的收缩压变化的最大百分比;SLGP功能定义为高频电刺激SLGP引起的窦性心律减慢的最大百分比;使用PowerLab数据采集系统记录和分析神经活性。于基础状态及1 h时抽取静脉血检测去甲肾上腺素的水平,并测定血压、心房、心耳和肺静脉各位点有效不应期和房颤易颤窗口、LSG和SLGP功能以及LSG、SLGP和LRSN的神经活性。实验结束后留取LSG和SLGP组织,进行分子生物学指标检测以明确其相关机制。3.将18只犬随机分为Con组、OSA组和无创迷走神经刺激(LL-TS)组(n=6/组):无创迷走神经刺激是由低强度经皮迷走神经耳支刺激(low level transcutaneous auricular vagal stimulation,LL-TS)达成。在基础状态及1 h时抽取静脉血检测去甲肾上腺素的水平,同时测定动脉血气、血压、心房、心耳和肺静脉各位点有效不应期、房颤易颤窗口、LSG和SLGP功能以及LSG、SLGP和LRSN的神经活性。实验结束后留取LSG和SLGP组织以检测分子生物学指标。结果:1.与Con组比,OSA组1 h动脉血气结果显示PaCO2显著升高、PaO2和pH显著降低(P均<0.05),提示急性OSA模型建立成功。此外,与Con组相比,OSA组1h、2 h及3 h的心房、心耳和肺静脉各位点有效不应期显著缩短,房颤易颤窗口显著延长(P均<0.05),但OSA组1 h、2 h及3 h之间的心房、心耳和肺静脉各位点有效不应期和房颤易颤窗口并无统计学差异(P均>0.05)。基础状态时,上述指标在Con组和OSA组中无明显差异(P均>0.05)。因此,在本研究中,急性OSA所致房颤模型的最佳时间为1 h。2.与Con组相比,OSA组1 h时心房、心耳和肺静脉各位点有效不应期显著缩短以及房颤易颤窗口明显延长(P均<0.05);于此同时,LSG功能和SLGP功能显著升高,LSG、SLGP和LRSN神经活性也显著增强(P均<0.05);此外,OSA组的收缩压、舒张压及血清去甲肾上腺素也显著上升(P均<0.05)。基础状态时,上述指标在Con组和OSA组中无显著性差异(P均>0.05)。另外,与Con组比较,Western blot和免疫荧光结果显示OSA组LSG和SLGP神经组织中的兴奋神经递质神经生长因子(NGF)和c-fos的表达显著上升(P均<0.05)。3.与OSA组相比,LL-TS可显著抑制急性OSA所致的LSG功能和SLGP功能升高以及LSG、SLGP和LRSN神经活性增强(P均<0.05);同时,LL-TS可明显抑制心房、心耳和肺静脉各位点有效不应期的缩短、房颤易颤窗口的延长以及去甲肾上腺素的升高(P均<0.05)。此外,LL-TS组LSG和SLGP组织中NGF和c-fos的表达水平也显著低于OSA组(P均<0.05)。结论:1.急性OSA可显著缩短心房、心耳和肺静脉各位点的有效不应期,增加房颤易感性,进而促进房颤的发生。另外,本研究中急性OSA所致房颤模型的最佳时间为1 h。2.内源性CANS和外源性CANS的过度激活参与了急性OSA所致房颤的发生;另急性OSA激活CANS的机制与其升高神经节组织内NGF和c-fos的表达相关。3.LL-TS可显著抑制急性OSA所致的内源性CANS和外源性CANS的过度激活,进而抑制急性OSA所致房颤的发生。LL-TS是一种新的有效的防治急性OSA所致房颤的无创治疗方法。