研究背景：随着我国基本国策的长期实施，我国老年人口的比例直线上升。老年人血管基础较差加上生活饮食习惯的改变，加大了脑血管病的发生机率，另外，现代生活模式的转变，使得人们运动量极少，这使得脑血管病的发病年龄呈现年轻化的趋势。脑血管病的高发病率、复发率、高致残率以及高额治疗费用已受到社会各界的重视。其中缺血性脑血管病在脑血管病中占到很大比重，约2/3。在人体的各种组织中，脑组织对缺氧的敏感性最高，大脑持续缺血缺氧4min就会造成永久性的损伤。患者因此出现的神经功能缺损症状恢复较慢甚至无法恢复，恢复到患病前程度的患者少之甚少。近年来，影像学的发展给脑血管病的诊断与分型提供了很大的便利，亦给治疗提供了方向，因此出现了很多新药。但是脑血管病的具体病理生理机制有待进一步研究。有大量的研究证实，在急性缺血性脑损伤中，氧化应激介导了脑组织的损伤。目的：通过经典的线栓法成功建立大鼠急性永久性局灶性脑梗死（pMCAO）模型，测定脑组织中核因子E2相关性因子2（Nrf2）及血红素加氧酶1（HO-1）表达情况及使用重组人促红细胞生成素（rhEPO）后的变化情况，进一步探讨rhEPO在急性脑缺血中的抗氧化作用机制。方法：采用随机法对动物进行分组：假手术组（n=12只）、模型组（n=12只）、rhEPO组（n=12只）。采用线栓法制备大鼠永久性局灶性脑梗死（pMCAO）模型，从颈总动脉分叉处计算，造模成功需要插入鱼线20mm左右长度，稍遇阻力后停止，将鱼线与颈总动脉结扎紧，假手术组插入鱼线约10mm，长度未及大脑中动脉。缺血2h时，rhEPO组腹腔注射rhEPO5000IU/kg，其余两组亦在缺血2h时给予等体积的生理盐水。缺血24h后，各组分别取6只大鼠在相应时间点深麻醉后，从心脏分别用37℃生理盐水、4%多聚甲醛灌注去血，为的是使组化背景清楚，不受血液干扰，待肝脏变白，灌注完成，立即断头取脑，于4℃冰箱内，中性甲醛固定24h后，取视交叉后1-4mm中段脑组织，石蜡包埋并切片，用于HE染色观察脑组织形态的变化情况及免疫组化法检测Nrf2与HO-1的表达；各组另外6只亦按相应时间点直接冰上断头取脑，不需去血，快速剥取左侧大脑皮层，锡箔纸包住后液氮速冻，再置于-80度冰箱，用于Western Blotting，测定Nrf2及HO-1的含量。结果：1、HE染色结果：假手术组脑组织结构正常，排列紧密，神经元与神经胶质细胞比例恰当，细胞形态正常，无水肿、空泡样结构。模型组有大片状液化灶形成，液化灶周围结构疏松，神经细胞核固缩，胞质呈深红色，胞体缩小变形，形态不规则。与模型组相比，rhEPO组亦有小片状坏死灶形成，但细胞水肿较轻，神经元坏死较少。2、免疫组化染色结果：假手术组有少量的HO-1阳性细胞，模型组和rhEPO组阳性表达细胞数较假手术组增多（P <0.05，P <0.05），且rhEPO组阳性细胞数多于模型组（P<0.05）。阳性表达主要为缺血区的神经元和星形胶质细胞的胞浆；假手术组有少量的Nrf2浆阳性细胞，模型组和rhEPO组有较多的Nrf2核阳性细胞，且rhEPO组较模型组明显增多，各组之间比较，均具有统计学意义（P <0.05）。3、Western Blotting结果：假手术组中，有少量的Nrf2及HO-1蛋白表达，维持细胞正常的生理功能，脑缺血发生后，在模型组中，胞浆内HO-1及核内Nrf2蛋白的量增加，使用rhEPO后，可以使核内Nrf2及胞浆内HO-1的表达量进一步增多，各组间两两比较，差异均具有统计学意义（P <0.05）。结论：1、急性脑缺血后，脑组织中的Nrf2、HO-1表达增高。2、rhEPO干预后，上调了Nrf2、HO-1的表达，rhEPO可能通过激活Keap1-Nrf2/ARE抗氧化系统而发挥脑保护作用。