小檗碱作为天然小分子药物具有抗炎解热等活性。研究显示小檗碱主要是通过抑菌抗炎作用治疗因炎症引起的发热。高温环境引起的热应激也会导致机体体温升高。本论文主要探讨小檗碱在热应激中对体温的调节及其可能的分子机制。通过控制环境温度(40°C)建立小鼠高温模型,同时监控记录小鼠的体温变化。结果表明小檗碱能够显著抑制由高温引起的体温升高,同时下调HSP70、TNFα的表达。在热应激中,使用HSP70抑制剂能够阻止小鼠体温升高,同时下调TNFα的表达。已知TNFα作为内生致热源之一,在体温调节过程中发挥重要的作用。由此提示HSP70、TNFα是体温调节中的重要因子,也是小檗碱这种解热作用的靶点。Western blot和Real-time PCR检测发现小鼠下丘脑中HSP70、TNFα的表达会随着热应激时间的延长不断升高,而小檗碱可以显著抑制其表达。体外PC12细胞实验也得到与小鼠实验同样的结果。体外细胞实验结果同时表明在不受神经体液调节的情况下,小檗碱依然可以下调HSP70、TNFα的表达,提示小檗碱可以通过调节细胞因子来影响体温。为了探索HSP70、TNFα之间的关系,我们通过构建HSP70敲低与过表达的细胞系并利用TNFαsi RNA、外源TNFα蛋白修饰TNFα基因的表达等,来观察两者的表达变化。结果表明HSP70与TNFα之间没有明显的信号转导上下游关系。免疫荧光染色、免疫共沉淀以及蛋白降解等实验结果表明HSP70作为分子伴侣,可以与TNFα结合并保护TNFα蛋白以增强其稳定性,从而避免其快速降解。通过构建启动子质粒、TATA box-GC box定点突变的启动子质粒、荧光光谱、EMSA以及CHIP等实验方法,证明小檗碱通过降低TBP与HSP70、TNFα基因转录起始区“TATA box”的结合,从而同时抑制其基因转录,使其表达下调,最终抑制体温的升高。小檗碱的作用位点位于基因启动子区的“TATA box”。本工作首次发现并证明小檗碱对于物理性热应激所致体温升高的直接抑制作用,及小檗碱位于HSP70和TNFα基因转录区的“TATA box”作用位点。对于进一步阐释小檗碱的解热作用机理具有重要的意义。同时为小檗碱防治热应激所致的体温升高(例如中暑)提供了重要的实验依据。