细胞生长和死亡调控基因的筛选、克隆和功能研究

来源 :中国科学院上海生命科学研究院生物化学与细胞生物学研究所 中国科学院上海生命科学研究院 | 被引量 : 0次 | 上传用户:daihaolr
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细胞的生长和死亡受到生长因子的严格调控,生长因子往往通过与细胞表面的膜受体结合而激活胞内的信号传导通路,引起某些原癌基因如c-myc、c-jun,c-fos等的高效表达,从而促进了细胞的生长与增殖;而且在一定的条件下,上述基因的过高表达还能诱导细胞的凋亡.c-Myc是以参与转录调节的方式来实现其对细胞生长和死亡的控制的.我们先构建一个c-Myc促进细胞生长,诱导细胞凋亡的细胞模型,然后在该模型中筛选和克隆参与细胞生长及死亡的调控的基因,并探讨其可能存在的功能.将人源c-Myc全长cDNA片段与鼠源的雌激素受体激素结合域的cDNA片段复合成嵌合ORF(c-mycer)后,插报告文学表达载体,并导入中国仓鼠卵巢细胞(CHO)使之获得高效的组成型表达.当细胞遭受环境压力时,细胞会上调某些分子伴娘蛋白如低糖/低氧调节蛋白和热休克蛋白等的表达以应对恶劣的外部条件.ASIP是线虫不对称分裂基因par-3和果蝇极性决定基因baxooka在哺乳动物中的同源物.asip/par-3/Bazooka是含有PDZ结构域的蛋白质,它们不对称分布于细胞的皮质,在细胞的极性决定和有丝分裂纹锤体排队列方向的调整过程中有重要的作用.我们还用RT-PCR技术分析了人类ASIP各转录本在人肝细胞肝癌临床组织样品中的表达,发现含有17b号外显子的转录该在肝癌及相应癌旁组织中的表达量是一致的,然而17b缺失的转录本的表达则在近半数的肝癌组织中下调.
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