酶联免疫吸附试验(Enzyme linked immunosrbent assay, ELISA)是一种适用于少量蛋白质检测和定量的试验方法,广泛应用于食品、工业、环境监测和临床医学等诸多领域。近年来,由于越来越多蛋白质标志物的出现,对疾病检测的要求也越来越高。然而,传统ELISA具有较低的灵敏度、较长的温育时间及混合样品检测困难等弊端。因此,为实现“快速、灵敏、简便”的免疫检测方法,本论文构建了电泳流动型ELISA体系：1.利用层层自组装(Layer-by-layer, LbL)技术构建聚电解质多层膜(Polyelectrolyte multilayers, PEMs),对PEMs的形成,膜厚及其稳定性进行研究;考察PEMs对第一抗体及封闭剂吸附作用的影响。2.构建电泳流动型ELISA体系,对模型抗原(mouse IgG)灵敏度测试,在最优的电压时间下(25 V,2 min),检测极限为33 pM,抗原抗体特异性反应时间是传统ELISA试验的1/30。3.C反应蛋白(C reactive protein, CRP)作为炎症的生物标记物验证了电泳ELISA系统的临床应用,在少干扰条件下,电泳驱动可实现时间和空间上分离抗原分子,CRP蛋白的检测极限为33 pM,抗原反应时间为2 min；4.为提高ELISA试验的灵敏度,实现信号放大的目的,电泳抗原技术和电泳纳米微球技术联合应用于ELISA试验中。在电泳驱动下,抗原分子(mouse IgG)的检测极限提高到0.13 pM,较电泳抗原的灵敏度提高254倍,抗原与第一抗体及抗原与第二抗体两步的反应时间均为传统ELISA的1/30。