木兰科含笑属及其相关属的ISSR系统发育分析

来源 :西南林学院 西南林业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:jh_viso1
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
含笑属(Michelia Linn,)植物是一类实用价值极高的珍贵木本资源,它所包含的种类的多少及其在木兰科中的分类地位长期以来是争议的焦点。本研究根据刘玉壶1984、1995及1996年增订的木兰科分类系统,以木兰科含笑属(41个种)、木莲属(4个种)、华盖木属(1个种)、木兰属(13个种)、盖裂木属(1个种)、单性木兰属(1个种)、拟单性木兰属(3个种)、长蕊木兰属(1个种)、合果木属(1个种)、观光木属(1个种)及鹅掌楸属(1个种)共11属68个种为实验材料,进行ISSR分子标记实验,建立了9属63个种的稳定反应体系,对9属63个种进行分子系统分析,并结合它们的形态学特征,首次从分子水平上探讨了木兰科含笑属与其相关属及含笑属内种间的系统分类地位及之间的亲缘关系,旨在为含笑属植物的系统分类、揭示各个种之间的亲缘关系提供分子信息,为该属的起源、演化和生物地理学问题探讨、多样性认识以及有效保护和可持续开发利用提供理论基础和科学指导。研究内容及结果如下:   1.DNA的提取:以含笑属中金叶含笑的叶片为实验材料,分别采用了CTAB法、改良CTAB法、简易提取方法、高盐沉淀法和SDS法等5种方法提取金叶含笑叶片的基因组DNA,并通过外观观察、琼脂糖凝胶电泳、紫外分光光度计及ISSR扩增4种方法对所提取的DNA样品进行检测。DNA纯度、含量比较以及扩增结果表明:5种方法中简易提取法和SDS法提取的DNA纯度较高,高盐沉淀法得到的DNA产量较高;5种方法提取的DNA用于ISSR扩增,其扩增结果基本一致。鉴于简易提取方法操作简单,省时省力,因此采用此法提取金叶含笑及其他各种基因组DNA。   2.反应体系的建立:以金叶含笑(含笑属)、多瓣含笑(含笑属)、马关含笑(含笑属)、日本辛夷(木兰属)、景宁木兰(木兰属)为实验材料,通过对影响ISSR扩增结果的主要因子:Mg2+浓度、dNTPs浓度、引物浓度、taq酶、模板DNA浓度等不同的浓度组合和扩增程序的试验研究,确定ISSR最适反应体系和扩增程序。即在25uL反应体系中包括Md2+1.5mmol/L、4种dNTPs各0.25mmool/L、引物0.4umol/L、Taq酶1U、模板约40ng、10×buffer2.5uL。PCR扩增程序为:94℃预变性5min,然后进行40个循环:94℃变性1min,52-60℃复性45S,72℃延伸2min,循环结束后72℃7min。   3.引物筛选:以金叶含笑为模板,通过对北京奥科公司合成的104条ISSR引物(加拿大哥伦比亚大学(UBC)提供序列)进行筛选,筛选出11条扩增条带较多、信号强、背景清晰的引物。ISSR引物及其退火温度分别为:P1、807、820、840(52℃),ISSR20、811、841、860、874(55℃),825、855(60℃)。   4.树系图的建立:基于ISSR扩增条带数据建立了2个UPGMA树系图,一是含笑属与相关属的总UPGMA树系图,二是含笑属属内的UPGMA树系图。根据刘玉壶分类系统(1984,1995及1996增订),在含笑属与相关属的总UPGMA树系图中,63个样本的木兰族和含笑族植物未完全分别聚在一起;在含笑属属内的UPGMA树系图中,含笑属各亚属植物也未完全分别聚在一起。   5.含笑属及相关属的分子系统发育:参照刘玉壶1984、1995及1996年增订的木兰科分类系统,综合木兰科植物11属63种植物的分子系统发育分析结果,支持木莲属、拟单性木兰属、单性木兰属、盏裂木属、长蕊木兰属、观光木属独立成属;木莲属和木兰属的皱种组与天女木兰组亲缘关系较近;建议重新界定木兰属范围,并成立玉兰属;建议将合果木属归入含笑属;建议取消含笑属下亚属和组的划分,设为含笑属。
其他文献
本研究以江西省赣江源国家自然保护区及喀斯特地区为对象,系统地从土壤团聚体干筛、湿筛、去除不同胶结物质后的团聚体分布特征、土壤团聚体稳定性与不同胶结物质间的相关性以
荷花属睡莲科莲属挺水植物。花大、瓣型丰富且颜色艳丽,大多分布于淡水水域,抗性强,观赏价值和经济价值都较高,是深受大众欢迎的水生植物之一。本研究从荷花中克隆得到荷花谷
信息时代、网络时代的到来使人际关系与人们的道德行为理念、价值观发生了巨变。网络空间的虚幻、刺激、无所不能使得人们在其中建立了虚拟与现实相交互的便捷、高效、立体、
目的:阐明苦参中“环状年轮”的结构特征及异常构造的产生,进一步讨论苦参的药用部位问题。方法:对苦参的根系及药材进行实地调查,并对其根系进行形态观察和发育解剖学研究。
在有源电力滤波器神经元自适应谐波电流检测方法的基础上,提出了一种模拟电路实现方案。PSPICE仿真及实验结果证实了该电路的有效性。 Based on the adaptive harmonic curre
菊花(Chrysanthemum morifolium)是原产我国的十大名花之一,也是世界四大切花之一,广泛用作盆花、切花和园林地被。盆栽菊具有观赏价值高,抗性强,生长势旺盛,分枝性强,着花繁密
在全球经济一体化和我国经济建设的大潮中,城市化的进程不断加快,公路建设行业在城市化进程中起到十分重要的作用。现代建设工程环境日益复杂,对工程技术的要求也愈来愈高,对
黑龙江省森林植物园始建于1958年,其雏形为园林苗圃基地,直到1988年,在引种自然植被的基础上,修建了药物园、水生植物园等一系列专类园景区,构建了全园多元化的植物景观主题功能分
介绍了中凸变椭圆活塞数控车削系统的构成及特点、活塞加工原理、控制软件的设计等项内容。汽车发动机活塞的形状复杂,传统的靠模加工法柔性差,不能满足现在汽车类型多样化、产
本文将浑善达克沙地桑根达来地区放牧区内的榆树疏林划分为丘间地、沙丘项部、背风坡、迎风坡4种立地类型进行研究,研究结果显示: (1)4种立地类型上榆树疏林的沙地榆种群年龄