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葡萄霜霉病(downy mildew, DM)是影响葡萄产量和品质的主要病虫害之一,其致病菌为霜霉菌(Plasmcopara viticola (Berk. and Curt.) Berl. and de Toni, PV)。前人的研究发现不同葡萄品种对霜霉菌的抗性差异较大,而且当受到霜霉菌侵染时,白藜芦醇及其衍生物(云杉新甙、紫檀芪、葡萄素)的合成也大不相同。基于这一现象,本文主要研究不同抗性葡萄品种受到霜霉菌侵染后,白藜芦醇及其衍生物的积累模式及其抗病机制。对霜霉病免疫的圆叶葡萄(Muscadine rotundifolia,Mr)品种’Noble’和’Carlos’、中抗的山葡萄(Vitis amurensis,Va)品种’左山一’和’双红’以及易感的欧亚种(Vitis vinifera)品种’无核白’和’霞多丽’接种霜霉菌后,叶片内白藜芦醇及其衍生物含量检测结果和相关合成酶基因qRT-PCR结果表明免疫的圆叶葡萄品种在接种后2小时至1天快速启动芪合酶(stilbene synthesis, STS)基因MrSTS和白藜芦醇甲基转移酶(resveratrol O-methytransferase, ROMT)基因MrROMT的上调表达,大量合成白藜芦醇、紫檀芪和ε-葡萄素。而易感的欧亚种在接种后3天VvSTS基因和糖基转移酶(glycosyltransferase,GT)基因VvGT上调表达,大量合成白藜芦醇和云杉新式。通过对圆叶葡萄品种’Noble’和欧亚种’无核白’的STS基因、ROMT基因和GT基因启动子克隆并进行比对,结果发现MrSTS基因启动子序列和VvSTS基因启动子序列相似性较低,仅81.12%,而MrROMT基因启动子序列和VvROMT基因启动子序列相似性高达99.83%,MrGT基因启动子序列和VvGT基因启动子相似性高达98.3%。采用葡萄叶片真空瞬时表达方法对圆叶葡萄品种’Noble’和欧亚种’无核白’的STS基因、ROMT基因和GT基因启动子进行体外表达,GUS染色结果发现VvSTS和MrSTS基因启动子受SA、ABA、MeJA、GA3和PV诱导表达;MrROMT基因启动子和VvROMT基因启动子均受SA、ABA和PV诱导表达;MrGT基因启动子和VvGT基因启动子均受SA、ABA、MeJA和PV诱导表达。通过UPLC-ESI-MS/MS技术检测接种霜霉菌的叶片中ABA、SA、MeJA和JA的含量,发现圆叶葡萄品种和山葡萄品种叶片中ABA、SA和MeJA含量明显高于其在欧亚种叶片中。对圆叶葡萄品种’Noble’和欧亚种’无核白’外施激素ABA、SA和MeJA,内源激素含量、白藜芦醇及其衍生物含量检测结果和相关合成酶基因qRT-PCR结果表明ABA和SA相互拮抗;ABA、SA和MeJA不同程度地诱导’Noble’和’无核白’中白藜芦醇及其衍生物的合成和相关合成酶基因的表达,但诱导程度低于霜霉菌的诱导。对圆叶葡萄品种’Noble’和欧亚种’无核白’离体叶片先外施激素ABA或SA后接种霜霉,白藜芦醇及其衍生物合成酶基因qRT-PCR结果表明,激素预处理有利于白藜芦醇及其衍生物的积累,提高宿主对霜霉菌的抗性。通过Gateway重组技术和双酶切方法构建MrSTS基因和MrROMT基因共转化表达载体,并进行烟草瞬时转化验证,GFP蛋白荧光显微观察、白藜芦醇和紫檀芪含量检测及相关合成酶基因qRT-PCR结果表明,P35S启动和自身启动子启动的MrSTS基因和MrROMT基因共转化表达载体 pH7FWG2/P35S::MrSTS/P35S::MrROMT 和 pH7FWG2/PMrSTS::MrSTS/ PMrROMT::MrROMT构建成功,能够进行体外表达,合成白藜芦醇和紫檀芪。