辛苯聚醇(Octoxynol-9,O-9)是应用广泛的壬苯醇醚(Nonoxynol-9,N-9)的类似物,也是一种非离子型表面活性剂类阴道用杀精剂,但其毒性较N-9小[1-2]。而现今的外用避孕制剂多存在易于泄漏,难以铺展覆盖阴道表面,在阴道内滞留时间短,生物利用度低的问题。温敏凝胶是在位凝胶的一种,可响应温度变化发生相变而具有独特的溶液-凝胶转变性质,从而有着给药方便、黏附力强、长时间滞留的特点,因此尤其适用于黏膜给药[3-4]。壳聚糖(Chitosan,CS)也是温敏凝胶体系中一种常见的材料,有着良好的生物降解性、生物相容性、无毒与抑菌性,是一种优良的生物粘附性材料,有延缓药物释放的作用[5-6]。因此本研究将安全性更高的O-9与优良的生物粘附材料CS结合,制备具有温度敏感性的新型阴道用制剂,可使制剂在阴道表面广泛覆盖,延长药物在阴道中的滞留时间,得到更安全、有效、使用方便的新型外用避孕制剂。本研究选择药用辅料泊洛沙姆(Poloxamer)与CS结合作为温敏凝胶基质,采用冷溶法制备辛苯聚醇阴道用温敏性凝胶[(O-9)-VTG],并用星点设计-效应面法优化处方,筛选出最优处方的基质配比为P407:P188:甘油:CS=16.3:5.7:5:0.6,按处方制备的(O-9)-VTG的胶凝温度为33℃,胶凝时间约1.6min。采用高效液相色谱法建立了(O-9)-VTG质量控制方法,并对3批样品进行了质量评价,含量分别为标示量的99.83%、100.69%、99.31%(n=3)。为探讨(O-9)-VTG的体外释放行为,采用无膜溶出法进行体外释放度的研究。结果表明,(O-9)-VTG释药模型拟合遵循零级方程。通过影响因素试验、加速实验及长期稳定性试验,以外观性状、pH、胶凝温度、O-9含量为指标对制剂进行初步稳定性考察,结果表明(O-9)-VTG具有良好的稳定性。采用试管倒置法可测得胶凝完全时的胶凝温度,但无法对凝胶的相变行为及凝胶强度等进行表征,因此采用动态流变学实验测定温敏凝胶在相变过程中的流变参数,可测得(O-9)-VTG的胶凝温度为32.6℃,与试管倒置法测得结果基本一致,其在室温下(25℃)具有良好的流动性,粘度小,为牛顿流体,易于注射入阴道内;置于阴道后可迅速铺展,在一定时间内胶凝后,凝胶粘度增大,具有假塑性流体特征。另外模拟了阴道液的稀释作用对(O-9)-VTG胶凝行为的影响,证实了(O-9)-VTG在体温条件下仍可形成凝胶。通过分别阴道给予雌性大鼠自制辛苯聚醇普通凝胶[(O-9)-gels]及(O-9)-VTG,收集含药阴道冲洗液,建立阴道冲洗液中药物含量测定方法,并采用DAS软件对阴道冲洗液中药物量进行处理得到(O-9)-gels和(O-9)-VTG的阴道内滞留时间,结果与(O-9)-gels相比,制备的(O-9)-VTG具有明显的阴道内粘附滞留性能。为评价制剂的有效性,以市售壬苯醇醚凝胶(N-9 Jelly)为对照,采用改良的Sander-cramer方法观察(O-9)-VTG的最低有效杀精浓度(MEC)对大鼠精子的作用,结果表明,(O-9)-VTG的MEC为0.50mg·ml-1,与N-9 Jelly的效果相当。大鼠阴道内给药后,使雌雄鼠合笼,观察避孕效果,得到(O-9)-VTG与N-9 Jelly均有较高的避孕率的结论,与自然对照组及空白凝胶组之间的差异具有显著性,表明(O-9)-VTG阴道用药具有较好的抗生育作用。阴道粘膜刺激性试验及阴道急性毒性试验以SD雌性大鼠为对象,通过肉眼和阴道病理切片观察,采用Eckstein刺激性评价标准评价刺激性,结果显示(O-9)-VTG对大鼠阴道无明显的刺激作用,局部急性毒性实验表明经阴道用药也无毒性。综上所述,本研究制备的(O-9)-VTG胶凝温度适宜,温度敏感性好,制剂质量稳定,具有一定的缓释作用,体内滞留时间长,组织相容性好,制备得到更安全、有效、使用方便的新型外用避孕药,也为辛苯聚醇阴道局部用药制剂的进一步开发研究提供依据和基础。