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Brevianamides是一类由丝状真菌青霉(Penicillium)或曲霉(Aspergillus)产生的异戊二烯基化吲哚类生物碱(prenylated indole alkaloids),该家族成员Brevianamide A与Brevianamide D对草地夜蛾(Spodoptera frugiperda)与烟芽夜蛾(Heliothis virescens)等鳞翅目昆虫的幼虫具有显著的抗虫活性。对丝状真菌短密青霉(Penicillium brevicompactum NRRL 864)的全基因组进行分析,利用生物信息学方法,以Aspergillus versicolor产生的notoamide A的生物合成基因簇为探针,在短密青霉NRRL 864基因组中挖掘出4个与真菌生物碱Brevianamide A生物合成相关的基因,并分析了其功能。以短密青霉NRRL 864的cDNA为模板,利用PCR技术克隆得到了除BvnA外的其余3个基因,并将这3个基因分别克隆至pET28b表达载体中。将3种构建好的表达载体分别转入E.coli BL21(DE3)中,获得了表达菌株,经异丙基-β-D硫代半乳糖苷(IPTG)分别进行诱导表达,表达菌株大量累积相关基因的编码蛋白。经Ni2+-NTA树脂亲和层析,获得了Bvn B和Bvn C编码的重组可溶性蛋白,而Bvn D编码的重组蛋白则以包涵体的形式存在,在进行了带有助溶性标签的重组蛋白表达和冻融变复性法尝试后,仍未能获得可溶性蛋白。对重组BvnC蛋白催化反应的底物特异性、产物结构以及酶促反应的动力学进行了分析。结果表明,在供试的十种化合物中,重组BvnC仅能催化以Brevianamide F为底物的转化反应。MS、NMR分析显示,以二甲基丙烯基二磷酸(Dimethylallyl pyrophosphate)为供体,重组BvnC蛋白能特异性催化异戊烯基转移至Brevianamide F的α位C上,生成Deoxybrevianamide E,验证了之前的推测。重组BvnC蛋白催化Brevianamide F转化反应的表观Km值为33.1μmol/L,kcat为1.5/min。由于未能获得可溶性重组BvnD蛋白,后续相关研究还在探索之中。该研究为阐明真菌生物碱Brevianamides的生物合成机制和以Brevianamides结构为基础的新型杀虫素的研制奠定了基础。