调控黄瓜花叶病毒复制的寄主脂质因子的研究

来源 :浙江理工大学 | 被引量 : 2次 | 上传用户:nancyqi117
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黄瓜花叶病毒(Cucumber mosaic virus,CMV)是一种正义单链RNA病毒,是雀麦花叶病毒科(Bromoviridae)黄瓜花叶病毒属(Cucumovirus)的代表性病毒,其基因组由三条单链正义RNA组成。已有研究表明,CMV的复制位于宿主液泡膜。液泡膜脂质是否调节CMV复制尚不明确。因此,液泡膜脂质成分的鉴定和分析对于研究CMV复制的分子机制具有重要意义。为了明确CMV侵染对于宿主液泡膜脂质成分的影响,我们利用LC-MS技术对液泡膜脂质进行质谱鉴定。在mock与CMV侵染植株中,总共鉴定到481种脂质,可以分为16种。比较mock和CMV侵染的液泡膜脂质发现:CMV的侵染导致宿主液泡膜中鞘脂类含量增加。随后,我们通过荧光定量PCR对本氏烟鞘脂类代谢相关基因进行定量分析,结果表明:CMV侵染引起部分鞘脂合成相关基因的表达量上调,其中3-酮基二氢鞘氨醇还原酶(TSC10)基因的上调最为显著。然后,我们通过烟草脆裂病毒(TRV)介导的基因沉默技术下调本氏烟中TSC10的表达量,并检测其对CMV积累的影响。有趣的是,TSC10下调显著降低了 CMV在植物中的积累水平,此外,液泡膜上CMV复制囊泡的数量没有明显变化。然而,TSC10沉默后对烟草花叶病毒和马铃薯X病毒的积累量没有明显影响。以上结果说明TSC10对CMV病毒的调控具有特异性。外施水杨酸(SA)能够上调TSC10的表达,说明CMV上调TSC10可能与SA信号通路有关。总之,CMV感染诱导参与鞘脂合成的一些基因的表达从而导致液泡膜中鞘脂组分的含量增加,正调节CMV的复制。我们的发现暗示了鞘脂在CMV复制中起重要作用。
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