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目的:探讨大肠癌组织中凋亡抑制蛋白Survivin与血管内皮生长因子VEGF及其受体FLT-1表达、相互关系及临床意义;观察Survivin在人大肠癌细胞系Caco-2、HT29、HCT116中的表达及siRNA沉默Survivin基因后对人大肠癌细胞系Caco-2、HT29、HCT116的Survivin蛋白表达、细胞增殖及凋亡的影响。方法:第一部分:采用免疫组织化学S-P法检测82例大肠癌组织和28例正常大肠粘膜组织中Survivin和VEGF及其受体FLT-1表达的状况;第二部分:以脂质体lip-2000为载体,用针对Survivin特异靶点的siRNA转染入3种不同分化的人大肠癌细胞系Caco-2、HT29、HCT116后,应用免疫细胞化学S-P法、Western Blot检测Survivin蛋白表达变化;MTT法检测细胞增殖;流式细胞术检测细胞凋亡。结果:第一部分:大肠癌组织中Survivin表达率为67.1%(55/82) ,VEGF及其受体FLT-1表达率分别为69.5% (57/82)和82.9%(68/82),均明显高于正常粘膜组织组(P<0.05)。Survivin表达与大肠癌的Duke’s分期有关(P<0.05)。VEGF表达与大肠癌淋巴结转移和Duke’s分期有关(P<0.05),受体FLT-1表达与各临床病理因素无关(P>0.05)。在大肠癌中Survivin表达与VEGF表达呈正相关(r=0.358,P<0.05),VEGF和FLT-1表达呈正相关(r=0.565, P<0.05)。第二部分:免疫细胞化学结果显示:三种细胞系(Caco-2、HT29、HCT116)的正常对照组,脂质体对照组及阴性错配对照组细胞浆均呈强阳性表达(深棕黄色),Survivin-siRNA组细胞浆均呈弱阳性表达(浅棕黄色);Western blot结果显示:Caco-2、HT29、HCT116细胞系Survivin-siRNA组细胞的蛋白条带亮度均明显低于正常对照组,脂质体对照组和阴性错配对照组;MTT检测结果:与阴性错配对照组相比,三种细胞系的Survivin-siRNA组和5-Fu组细胞生长出现明显的抑制(P<0.05)。同一种细胞系Survivin-siRNA组中,不同时段(24h、48h、72h)肿瘤细胞增殖抑制率之间有显著差异(P<0.05)。同一时间阶段不同细胞系(Caco-2、HT29、HCT116)的Survivin-siRNA组的抑制率之间差异有统计学意义(P<0.05);流式细胞术检测结果表明:与空白对照和阴性错配对照细胞组相比,Caco-2、HT29、HCT116细胞的Survivin-siRNA组,均出现明显亚二倍体峰,细胞凋亡比例分别为9.72%,19.67%,22.16%。三种细胞系随着分化越来越差,其凋亡比例有增高的趋势,其趋势有统计学意义(χ2趋势=542.34,P<0.01)。结论:第一部分:Survivin和VEGF表达在大肠癌发生过程中起重要作用,检测Survivin和VEGF表达水平有助于反映大肠癌进展和预后判断;第二部分:siRNA沉默Survivin基因可以抑制大肠癌细胞增殖,促进凋亡;Survivin可能成为大肠癌基因治疗的一个新靶点,应用RNA干扰技术有望成为大肠癌基因治疗的一种有效的方法。