番茄耐热鉴定体系的建立及种质资源筛选和耐热分子机制研究

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番茄(Solanum lycopersicum L)在我国已有多年种植历史,是我国重要的经济作物。在我国南方,夏季高温或温室高温严重影响番茄的正常生长发育,高温胁迫已经成为造成番茄减产的主要原因。为此,本实验研究了150份番茄自交系对高温胁迫的生理生化响应,为鉴定和筛选耐高温品种提供理论依据和技术支持,系统建立了番茄耐热体系鉴定方法。通过SSR分子标记技术,结合聚类分析,对150份番茄材料进行了遗传多样性分析。对番茄热激蛋白、热激转录因子基因进行生物信息学分析,研究热激蛋白在高温胁迫下的基因表达差异,主要研究结果如下:(1)本研究以150份番茄自交系为试验材料,通过高温处理番茄幼苗,研究幼苗分别在高温处理0d,2d,4d后丙二醛、抗氧化酶活性以及脯氨酸含量的变化,筛选出耐热性较强的品种和对高温敏感的品种。建立了以叶绿素、电导率和脯氨酸为耐热指标的番茄耐热筛选体系,成功筛选出15份耐热材料,12份不耐热材料。结果表明番茄耐热性与抗氧化酶活性密切相关,不同品种的番茄对高温有不同的耐受力。(2)本研究以供试材料番茄DNA为模板经过重复试验从83对SSR引物中筛选出13对扩增条带清晰的特异性引物,采用UPGMA法进行聚类分析,绘制出番茄SSR分子标记遗传相似聚类分析树状图,在相似系数0.65水平上,可将资源分为2类分别为大果型普通番茄和小果型樱桃番茄。(3)通过生物信息学分析番茄和拟南芥中热激蛋白基因和热激转录因子基因相关信息,并构建系统发育进化树。发现在番茄中包含166个热激蛋白基因,其中7个HSP 90,19个HSP 70,7个HSP 100,112个HSP 40,21个HSP 60,24个热激转录因子基因。通过筛查与番茄热激蛋白基因密切相关的SNP位点信息,初步明确热激蛋白基因中SNP位点的种类和分布,多数SNP位点分布于非编码区。通过Q-PCR分析热激蛋白基因在高温胁迫下表达水平。
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