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目的:以大鼠心肌细胞H9C2细胞为研究对象,从细胞水平构建缺氧复氧损伤模型,模拟心脏MIRI。通过葱白提取物单体硫化物二丙基二硫(S1),对缺氧复氧模型细胞进行预处理,观察检测内质网应激及细胞凋亡相关指标的变化,探讨葱白提取物单体硫化物S1在内质网应激诱导的H9C2细胞凋亡途径中的作用机制。方法:培养大鼠H9C2心肌细胞,随机分组为7组,采用MTT法在24h下检测正常对照组(con组)、溶剂对照组(0.1%DMSO)、不同浓度的S1处理组(1μg/ml,10μg/ml、50μg/ml、100μg/ml、1000μg/ml)H9C2细胞活性;制备模型:将H9C2细胞随机分为4组,正常对照组(con组)、缺氧4h复氧0h(4h/0h)、缺氧4h复氧4h(4h/4h)、缺氧4h复氧16h(4h/16h),通过Western blot检测内质网应激标志蛋白GRP78表达情况,确定缺氧复氧诱导H9C2细胞发生内质网应激的时间,构建H9C2细胞缺氧复氧损伤模型;根据前期结果将H9C2心肌细胞随机分为5组,正常对照组(con组)、不同浓度(10μg/ml、50μg/ml、100μg/ml)S1预处理30min后的缺氧复氧组、缺氧复氧组(H/R组)。Annexin V-FITC/PI双染色和流式细胞计数仪检测各组H9C2细胞凋亡情况。荧光定量PCR和Western blot检测胞内相关蛋白GRP78,CHOP,caspase-3、Bcl-2表达情况。结果:1.MTT结果显示:葱白提取物单体硫化物S1的浓度为10μg/ml、50μg/ml、100μg/ml能促进细胞增殖(P<0.01),S1浓度为1000μg/ml时对细胞有毒性作用(P<0.01),低浓度溶剂(0.1%DMSO)及S1浓度为1μg/ml对细胞无明显影响(P>0.05);2.缺氧复氧H9C2细胞损伤模型条件:与con组比,细胞缺氧4h,复氧0h、16h后,GRP78的表达差异无统计学差异。(P>0.05)。在缺氧4h复氧4h时,GRP78上调结果显著(P<0.05),由此确立诱导H9C2细胞发生内质网应激的缺氧复氧模型;10-1000μg/ml范围内,细胞存活率明显升高,细胞凋亡率明显下降。3.Annexin V-FITC/PI双染色和流式细胞计数仪检测:经过S1预处理后,在4.荧光定量PCR和Western blot检测:内质网应激凋亡通路相关蛋白GRP78、CHOP、caspase-3表达量较H/R组明显下降,而抗凋亡蛋白Bcl-2明显上调(P<0.05)。结论:1.葱白提取物单体硫化物S1在10-100μg/ml浓度范围内可促进H9C2细胞增殖,呈浓度依赖性。2.缺氧复氧损伤能使心肌细胞存活率显著性降低,细胞凋亡率明显增高,经葱白提取物单体硫化物S1预处理,可降低细胞凋亡率。3.葱白提取物单体硫化物S1抑制内质网应激诱导的细胞凋亡,可能通过GRP78,CHOP,caspase-3蛋白上调表达、下调Bcl-2蛋白的表达有关。