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解淀粉芽孢杆菌MG-3菌株是从芒果叶片中分离得到,对枇杷炭疽病菌等多种病原真菌均有较强的抑制效果。本文对MG-3菌株的抑菌成分进行分析,探究其抑菌活性及防病机理。结果如下:(1)以枇杷炭疽病菌为指示菌,首先用Plackett-Burman设计筛选出影响抑菌率的关键因素;通过最陡爬坡试验得出关键因素的中心点;最后通过Central Composite Design设计及分析确定最佳培养基配比。结果表明,关键因素及其配比为:淀粉13.32 g/L,牛肉膏5.05 g/L,乙酸铵10.78 g/L。在最佳发酵条件下,MG-3菌株的抑菌率预测值为71.70%,验证试验所测的抑菌率为70%,比优化前提高了 1.12倍。(2)首先,研究MG-3发酵上清液对接种枇杷炭疽病菌后枇杷果实保鲜效果的影响。结果表明,MG-3可抑制由炭疽病菌入侵后枇杷果实的发病率和褐变度,降低了果实呼吸强度,延缓了果实衰老和腐烂。其次,研究MG-3发酵上清液对接种枇杷炭疽病菌后枇杷果实活性氧代谢的影响。结果表明,MG-3处理可显著提高果实的超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)和抗坏血酸过氧化物酶(APX)活性,提高抗坏血酸(ASA)和谷胱甘肽(GSH)含量,同时减小超氧阴离子(O2-)产生速率、细胞膜透性、丙二醛(MDA)含量及脂氧合酶(LOX)活性(与对照组相比)。最后,研究MG-3发酵上清液对枇接种炭疽病菌后枇杷果实的抗病性的影响。结果表明,MG-3处理可以显著提高果实的苯丙氨酸解氨酶(PAL)、多酚氧化酶(PPO)、过氧化物酶(POD)、几丁质酶(CHI)及β-1,3-葡聚糖酶(GLU)活性(与对照组相比),提高总酚和木质素含量,诱导果实的抗病能力,降低病情指数。(3)采用中压RP-C18柱层析、SephadexLH-20凝胶柱层析、正相硅胶柱层析和薄层层析等方法对菌株MG-3发酵上清液中的抑菌成分进行分离纯化,得到纯化物L-1。通过Q-TOF-MS分析,确定L-1为脂肽类抗生素IturinA(C14~C15)。(4)研究Iturin A对枇杷炭疽病菌的抑菌试验,结果表明,Iturin A可抑制菌丝生长及孢子萌发,对枇杷炭疽病菌的半数抑制浓度(IC50)、最小抑制浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MFC)分别为36.47、74.95和110 μg·mL-1。光学显微镜观察发现,IturinA可使菌丝呈现畸形和膨大等现象。生理指标测定发现,IturinA能使菌丝细胞膜透性和MDA含量增加,使蛋白质含量减少,但不能降解几丁质。且IturinA能明显降低果实的病斑直径,显著抑制炭疽病的发生。