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选择发热、贫血、黄疸症状明显的奶牛,通过鲜血压片、血液涂片染色镜检和电镜观察等方法对温氏附红细胞体形态学、运动学和染色特性等生物学特性进行研究。结果表明:鲜血压片后光镜下观察,温氏附红细胞体向任意方向作翻转、扭转运动。姬姆萨氏染色和瑞氏染色后光镜下观察,红细胞分别被染成蓝色和粉红色,附着在红细胞上的温氏附红细胞体都被染成紫红色,且具有折光性;改良瑞氏染色后光镜下观察,红细胞被染成深紫色,温氏附红细胞体被染成紫红色;吖啶橙染色后荧光显微镜下观察,红细胞为暗绿色,温氏附红细胞体为发明亮荧光的绿色小体;电镜观察,温氏附红细胞体呈球状、饼状、卵圆形等多种形态,直径为0.3~0.8μm,通过纤毛附着在红细胞表面,并使红细胞膜形成小孔。对同一病例,根据温氏附红体的运动学以及在姬姆萨氏和瑞氏染色镜检的基础上,联合采用改良瑞氏染色和吖啶橙染色镜检能够提高温氏附红细胞体的检出率。
以含0.5%硬脂酸铝的10#白油为油相,含咪唑苯脲的饱和蜂胶水溶液为水相,按照油水相2∶1进行乳化,研制咪唑苯脲缓释剂。在单因素试验的基础上,选取影响缓释剂性质较显著的3个因素,即乳化温度、转速和乳化时间,每个因素三个水平,在不破乳和储存稳定条件下,以缓释剂粘稠度为响应值,通过响应面试验设计确定缓释剂制备的最佳工艺,并对制备的缓释剂从粒径大小与分布、通针性、稳定性、安全性和体外释药特性等进行质量评价。结果表明:响应面优化所得的最佳乳化工艺条件为:乳化温度60℃,转速9508r/min,乳化时间4min,此时缓释剂的粘稠度为9.74s,粘稠度最小。在最佳工艺条件制备的缓释剂粒径小、分布均匀、通针性好、毒性小、安全、稳定、没有明显的突释现象,在48h内累积释药百分率为98.7%,其常规的水剂6h已达到99.5%,能够起到缓释的作用。
选择15头温氏附红细胞体感染率80%以上的奶牛,随机分成3组,每组5头,分别为感染对照组、咪唑苯脲水剂组和缓释剂组,另设1个健康对照组。比较各试验组在治疗前后红细胞感染率、生理生化指标和免疫指标变化。结果表明:咪唑苯脲缓释剂治疗效果显著优于其常规剂型,且能够提高机体的免疫力。