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目的:通过Apelin干预抵抗素诱导的H9c2大鼠心肌细胞肥大模型,检测心肌细胞表面积大小、单细胞总蛋白合成量、实时荧光定量PCR技术检测心肌细胞肥大标志物BNP和β-MHC的表达,研究其对抵抗素诱导的H9c2大鼠心肌细胞肥大的影响,探索有效防治心肌细胞肥大的新方法,为其应用于临床心力衰竭的防治提供理论依据。方法:H9c2大鼠心肌细胞是源于BD1X大鼠胚胎心脏组织的亚克隆细胞株,用含10%FBS的DMEM培养,每2-3 d换一次培养液,待细胞长到70%-80%时传代培养。在倒置显微镜下观察,H9c2大鼠心肌细胞呈圆形或椭圆形,未见心肌搏动。取长势良好的细胞用于实验。将1×105个H9c2大鼠心肌细胞分别接种于6孔板内,加入含10%FBS的DMEM 3 ml培养,待细胞贴壁后,换含0.1%FBS的DMEM 3 ml饥饿16 h。根据实验目的分为4组,C组(对照组):0.1%FBS的DMEM饥饿细胞后换含0.1%FBS的DMEM 3 ml培养48 h。R组(抵抗素组):0.1%FBS的DMEM饥饿细胞后换抵抗素浓度为50 ng/ml的含0.1%FBS的DMEM 3 ml培养48 h。A组(抵抗素+Apelin组):0.1%FBS的DMEM饥饿细胞后换Apelin浓度为10μmol/3 ml的含0.1%FBS的DMEM 3 ml培养2 h后,换抵抗素浓度为50 ng/ml的含0.1%FBS的DMEM 3 ml培养46 h。N组(抵抗素+Apelin+LKB1抑制剂组):0.1%FBS的DMEM饥饿细胞后换LKB1抑制剂(NHE)浓度为20μmol/3 ml的含0.1%FBS的DMEM 3 ml培养2 h后,换Apelin浓度为10μmol/3 ml的含0.1%FBS的DMEM 3 ml培养0.5 h后,换为抵抗素浓度为50 ng/ml的含0.1%FBS的DMEM 3 ml培养45.5 h。培养48 h后,细胞拍照,Image J软件分析细胞表面积;收集细胞计数,BCA法测总蛋白含量,计算单细胞总蛋白含量;实时荧光定量PCR检测心肌细胞肥大标志物BNP和β-MHC的相对表达量。结果:与C组相比,R组心肌细胞表面积、单细胞蛋白合成量以及心肌细胞肥大标志物的相对表达量明显增加,差异有统计学意义(P<0.01),成功构建抵抗素诱导的H9c2大鼠心肌细胞肥大模型。与R组相比,A组心肌细胞表面积、单细胞蛋白合成量以及心肌细胞肥大标志物的相对表达量明显降低,差异有统计学意义(P<0.01);与R组相比,N组心肌细胞表面积、单细胞蛋白合成量以及心肌细胞肥大标志物的相对表达量无明显减小,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:抵抗素可以诱导H9c2大鼠心肌细胞肥大;Apelin有抑制抵抗素诱导的H9c2大鼠心肌细胞肥大的作用;Apelin抑制抵抗素诱导的H9c2大鼠心肌细胞肥大的作用机制可能是通过激活LKB1/AMPK信号通路实现的。