【摘 要】
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在实际环境中,同一手性农药的不同对映体对生物所表现出的毒性效用可能是不同的;因此需要从对映体层面分析手性农药对环境的影响。本论文使用高效液相色谱法对叶菌唑(MEZ)外消旋体进行对映体分离,以水华微囊藻为受试生物,探究MEZ对光合活性、藻蛋白、藻细胞超微结构以及藻毒素含量的对映体选择性影响情况;最后进一步研究MEZ外消旋体与常见抗生素共暴露下的联合毒性,得出以下结论:(1)MEZ手性拆分条件为:手性
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在实际环境中,同一手性农药的不同对映体对生物所表现出的毒性效用可能是不同的;因此需要从对映体层面分析手性农药对环境的影响。本论文使用高效液相色谱法对叶菌唑(MEZ)外消旋体进行对映体分离,以水华微囊藻为受试生物,探究MEZ对光合活性、藻蛋白、藻细胞超微结构以及藻毒素含量的对映体选择性影响情况;最后进一步研究MEZ外消旋体与常见抗生素共暴露下的联合毒性,得出以下结论:(1)MEZ手性拆分条件为:手性柱Chiralcel OD-H,柱温25℃,流动相为正己烷/乙醇=97:3,流速为0.8 m L/min,检测波长为220 nm,进样量为20μL。出峰顺序依次是:cis-1R,5S-MEZ、cis-1S,5R-MEZ、trans-1S,5S-MEZ、trans-1R,5R-MEZ。(2)光合活性与蛋白含量的变化:在染毒的8天内,0.01~0.1 mg/L MEZ对映体会不同程度的降低叶绿素a含量;cis-MEZs(>0.03 mg/L)先会增加类胡萝卜素(Car)含量,但在第8天下降;0.01~0.1 mg/L trans-MEZs也会降低Car含量;cis-MEZs(>0.03 mg/L)会降低Fv/Fm,而trans-MEZs组的Fv/Fm与对照无显著差异(P>0.05);cis-MEZs(>0.03 mg/L)会降低快速光响应曲线(RLCs),而trans-MEZs组RLCs则与对照无显著差异(P>0.05)或高于对照(P<0.05);cis-MEZs(>0.03 mg/L)会先增加光能利用率(α),但在第8天降低;trans-MEZs组α值在0.001~0.01 mg/L有所增加,而0.03~0.1 mg/L组与对照无显著差异(P>0.05);0.01~0.1 mg/L cis-MEZs和0.1 mg/L trans-MEZs会抑制藻蛋白含量(PC、APC、PE和蛋白)。总体上,MEZ毒性大小为:cis-1S,5R-MEZ>cis-1R,5S-MEZ>trans-1S,5S-MEZ和trans-1R,5R-MEZ。(3)染毒4天后超微藻细胞结构的变化:0.03 mg/L cis-MEZs会导致细胞变形,质壁分离,类囊体数量减少且排列垂直,细胞器官模糊,细胞裂解等;而0.03 mg/L trans-MEZs组细胞基本保持原有形态,类囊体数量稍减,细胞器官较为清晰,细胞未出现裂解。(4)0.03 mg/LMEZ对映体对藻毒素(MC-LR)含量的影响:在第4天,cis-MEZs组胞内MC-LR含量高于trans-MEZs组,在第8天,cis-MEZs组胞内MC-LR含量则低于(P<0.05)或与trans-MEZs组无显著差异(P>0.05);但胞外的MC-LR含量始终是cis-MEZs组高于trans-MEZs组;总MC-LR含量也是cis-MEZs组多于trans-MEZs组。(5)MEZ和四个抗生素的联合毒性:用指标法评估了MEZ、四环素、土霉素、恩诺沙星和环丙沙星的联合毒性效用,结果为拮抗作用,但其存在局限性;再用模型法预测整个效应区间上的联合毒性效应,IA模型相较于CA模型具有较好的预测效果,毒性作用为:低浓度为协同,中浓度为相加,高浓度为拮抗。
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