论文部分内容阅读
研究目的:本实验旨在观察嗅鞘细胞(OECs)和L-NNA联合作用对大鼠脊髓半横断损伤后背核神经元存活及其轴突再生的影响。
研究方法:取SD雌性大鼠20只,体重200±20g,右侧T11脊髓半横断后分四组处理:(1)对照组:脊髓半横断,损伤处移植浸有DMEM/F12培养液5μl的明胶海绵,术后每日腹腔注射生理盐水;(2)OECs组:损伤处移植浸有OECs悬液5μl的明胶海绵,术后每日腹腔注射生理盐水;(3)L-NNA组:损伤处移植浸有DMEM/F12培养液5μl的明胶海绵,术后每日腹腔注射L-NNA(20mg/kg);(4)OECs+L-NNA组:损伤处移植浸有OECs悬液5μl的明胶海绵,术后每日腹腔注射L-NNA(20mg/kg)。5组动物于术后26d在T9脊髓处注射荧光金,第30d被灌注取材,L1脊髓作连续冰冻横切片(片厚30μm),NADPH-d组织化学染色加中性红复染,10×40倍镜下计数L1脊髓背核存活神经元数包括其分类计数,NOS表达情况以及背核有无被荧光金标记的神经元。T8~T12脊髓作纵切片(片厚25μm),分别做NGFRP75、NF、LN、CSPG免疫荧光染色及损伤区HE染色,观察移植细胞存活迁移情况以及损伤区与周围宿主整合情况。
研究结果:①OECs组、L-NNA组L1背核神经元存活数均高于对照组,且分类计数显示这两组对脊髓大、中、小神经元存活均有促进作用,而OECs+L-NNA组的促存活作用最显著。②OECs组和OECs+L-NNA组L1损伤区可见NF阳性纤维,且其背核均可观察到被荧光金标记的神经元,其中OECs+L-NNA组效果更佳,而对照组和L-NNA组则无此情况。③对照组NOS表达阳性,OECs组NOS阳性表达增强,L-NNA组NOS表达显著降低,而OECs+L-NNA组NOS表达与对照相差不大。
研究结论:嗅鞘细胞和L-NNA均可促进受损背核神经元存活,但L-NNA对其轴突再生无明显作用,两者联合可更好的促进受损背核神经元存活及轴突再生。