α-硫辛酸、维生素P和L-肉碱对猪精液常温和低温保存效果的研究

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猪的人工授精技术应用使得优秀种公畜的种质资源得到广泛的传播,加快了遗传进展,促进了养猪效益的提高。目前用于人工授精的猪精液主要有两种储存方式,即冷冻保存和液态保存。由于猪精子质膜上不饱和脂肪酸含量高,使其对于冷冻保存过程中的温度变化极为敏感,导致冷冻解冻后精子的活率低,无法满足人工授精对猪精液品质要求。目前在养猪生产上,液态储存仍然是精液储存的主要方法。在液态储存过程中,精子会发生氧化应激。精子的氧化应激是是指在精液的稀释处理过程产生的自由基与质膜、精子中的蛋白甚至是DNA发生反应,造成精液品质下降。氧化应激是猪精液储存过程中的对精子造成损伤的主要因素。因此,我们希望通过添加这一些抗氧化剂,减轻猪精液在常温和低温储存过程产生的氧化应激,提升猪精液储存过程中的品质,更好地服务于养猪生产。本试验选取了α-硫辛酸、维生素C、牛磺酸、维生素P和L-肉碱5中抗氧化剂分别加入选取的三种猪精液稀释液(Zorlesco,Androhep, Mondena),将之置于常温和低温进行储存。常温储存过程中分别在储存的第6、12、18天对精子的活力、活率、顶体完整率、质膜完整率线粒体活性及MDA水平进行测定。低温储存的检测日期分别是第3、6和9天。每个处理重复三次,最后对试验结果进行单因素方差分析,共得出如下结果:1.α-硫辛酸和维生素C没有对猪精液的常温和低温储存起到保护作用,相反,当这两种物质浓度大于25μg/ml时,它们对于精液的储存具有剂量依赖性的毒害作用。2.牛磺酸对于猪精液的常温和低温储存均具有较好的作用。与对照组相比较,添加牛磺酸至猪精液稀释液中显著地提高了猪精液储存过程中猪精子活力、活率、顶体完整率、质膜完整率及线粒体活性,降低了精子产生的MDA。常温和低温储存条件下,三种稀释液牛磺酸的最适宜浓度均为200μg/mL。3.维生素P对于精液的常温和低温储存具有积极的作用。三种稀释液中添加维生素P显著地提高了精子常温和低温储存过程中精液的品质。常温条件下,Zorlesco,Androhep和Mondena中维生素P的适宜添加浓度分别为80、120和80μg/mL。低温储存条件下三种精液稀释液中维生素P的最适宜浓度为120、80和120μg/mL。4.L-肉碱对三种精液稀释液低温储存猪精液具有有益的作用。在精液储存的第6和9天,L-肉碱的添加显著地提高了猪精液的活力、活率、顶体完整率、质膜完整率和线粒体活性,降低了脂质过氧化水平。在低温储存条件下L-肉碱在Zorlesco, Androhep和Mondena中的最适浓度分别为120、120和300μg/mL。
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