压力诱导下终板软骨mTOR蛋白表达变化及意义

来源 :皖南医学院 | 被引量 : 1次 | 上传用户:roy1984
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目的:探讨兔椎间盘器官培养模型在循环压力诱导下,终板软骨细胞mTOR蛋白及基因表达变化及意义。方法:6月龄36只新西兰大白兔(雌雄不限),采用随机数字法分组,分为加力组和对照组,在处死实验动物前,每只兔静脉给予1.3ml肝素(5000U/mL),待其在体内循环5分钟后再行处死。然后在无菌条件下完整取出两组新西兰大白兔带部分椎骨的腰段椎间盘,放入含有15%胎牛血清的培养液里进行培养。其中针对加力组椎间盘利用动物椎间盘加力器对其施以0.2MPa力值,每日加压一次,每次加压时长为30min。两组器官模型经过各个时段的培养后,HE染色观察大体组织形态学变化;番红O染色观察椎间盘细胞外基质变化;Real-time PCR和Western-blotting检测AGN、COLⅡ及mTOR等基因的mRNA的表达;mTOR蛋白及其磷酸化蛋白的表达。结果:对照组及加力组椎间盘器官培养至第7天,其组织形态学、基质及AGN、COLⅡ、mTOR等基因表达与0天组相比无明显变化。14天对照组及加力组均表现为组织形态学及基质破坏,7天加力组、14天对照组及加力组AGN、COLⅡ等基因表达下降。磷酸化mTOR蛋白及mTOR基因检测表达变化趋势一致,随加压时间的延长而增加,但总mTOR蛋白表达不变。结论:循环压力诱导椎间盘退变过程中,mTOR基因以及磷酸化mTOR蛋白的表达随加力时间的延长而增加。调控mTOR信号通路可能会缓解甚至阻断终板软骨退变,进而为椎间盘退变的防治可能提供新的靶点。
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