在整形外科领域移植软骨活性的保存始终是研究的热点。软骨作为一种生物性移植材料以其优越性而成为整形外科最常用的材料之一，它在修复缺损、矫正畸形等方面起到了良好的充填和支架作用。喉癌和喉狭窄是临床上较难处理疾病，喉狭窄及喉癌手术病人喉功能重建的研究已成为关注热点。喉成形重建术中关键问题是软骨支架的重建，而软骨支架的取材问题仍未根本解决。用自身移植物修补骨骼缺损在整形外科是最常用的，但也存在一些问题。有些病情必须进行延期或晚期的软骨移植术或多期重建术，如何保存软骨组织的活性，对保证移植物的成功至关重要。既往保 第四军医大学2000级博士论文存软骨的方法常用的有：化学保存方法如用甲醛和硫柳汞等保存的软骨都会导致软骨失去活性，此种无活性的软骨移植物因其易变形、吸收及排斥反应大等缺点，而使其应用大为受限。现今软骨库的来源多为用甲醛、硫柳汞、生理盐水等化学方法保存的软骨，而所有化学保存方法都有降低或消除软骨活性的缺点。近年，有人尝试用组织培养法来保存软骨，但其结论不一，各有其局限性。既往我们曾进行了用组织培养法于体外保存动物甲状软骨活性的实验，可在30天内较好地保存软骨活性，用所培养的软骨进行同种异体移植后，可较好地修复甲状软骨缺损。 临床治疗所需软骨的体积往往较大，且许多手术治疗需要带软骨膜的软骨。而既往所培养的软骨存在体积小及无软骨膜等缺点，所培养时间也较短，阻碍了其应用发展。此外，对人的软骨是否能用组织培养法在体外长期保存活性也未进行研究。为此，在以往实验基础上，本研究着重观察用组织培养法于体外长期保存动物及人较大体积活性软骨块及带软骨膜软骨的可行性，同时观察用所培养软骨进行同种异体及异种移植后其移植修复效果。为建立体外稳定软骨库提供理论基础，并为临床整形修复治疗提供一种新型的修复材料奠定基础。 －〕－ 第四军医大学2000级博士论文 实验取新西兰白兔全厚层喉甲状软骨、带膜及不带膜肋软骨和人带膜及不带膜肋软骨及鼻中隔软骨，大小约 smmXZmmX Inun至 25minX20mm X Zmm，用 RPMi－1640培养液进行组织培养，在保存 5天、10天、20天、30天、60天、90天、120天、150天及 180天时分别用倒置显微镜、光镜及台盼蓝排斥试验检测软骨活性。与此同时，取所培养软骨进行动物移植实验及临床应用观察。一方面，将自体软骨、新鲜的和培养的同种异体带膜及不带膜软骨以及所培养的人的带膜及不带膜软骨移植于同一兔背部，分别于7天、30天、60天、90天、120天、150天、180天、200天、300天及370天时取标本观察移植效果。另将培养的人的软骨移植于动物甲状软骨缺损处，观察移植修复效果。另一方面，将培养的人的软骨进行临床应用，观察其治疗效果。结果发现，用 yMI刁 640培养液所保存软骨在培养半年后仍保持较好活性。用新鲜的和培养的同种异体带膜及不带膜软骨进行移植后，与受体组织相容性好，移植排斥反应小。培养的人的带膜软骨进行异种移植后，其移植排斥反应明显弱于不带膜软骨。通过本实验得出结论，用组织培养法能较长期地在体外保存人及动物的软骨活性，并且用组织培养法保存的活性软骨进行同种异体移植时其移植排斥反应 －6． 第四军医大学2000级博士论文小，修复效果满意，异种带软骨膜软骨也有较好的移植效果。本实验为建立体外软骨库奠定了一定基础，有望为临床提供一种新型软骨材料。