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延脑头端腹内侧区(rostral ventromedial medulla, RVM)这一特殊的中枢核群是痛觉调制环路中一个重要结构,RVM能整合由PAG和大脑前叶下传的情绪和感觉信号,投射到脊髓背角,调制伤害性感受信号的上传,并与慢性痛时痛过敏的产生有关。因为RVM是起源于PAG的内源性下行抑制系统最重要的接替核团,因此,研究者们多认为RVM活化后仅起到抑制脊髓伤害性信息传递的作用,但后来发现电刺激或化学刺激RVM也可易化脊髓活动和后角神经元对伤害性刺激的反应。 已经证实,神经降压肽(NT)及其受体(NTS)在RVM区均有表达,并且NTS2的mRNA水平明显高于NTS1,NTS2基因缺陷的小鼠对伤害性刺激的反应也明显弱于NTS1基因缺陷及野生型小鼠,提示该两种受体在痛觉调制上具有不同的效应,而 NTS2在NT的痛觉调制中可能起着更重要的作用。。 本研究利用动物行为学方法结合形态学方法观察了RVM区NTS2受体在坐骨神经慢性压迫性损伤(CCI)模型中的表达变化,通过 RVM区注射神经降压肽受体拮抗剂SR142948A观察其对RVM区NTS2受体表达和大鼠痛阈的影响,从而初步探讨RVM区NTS2受体在痛觉调制中的作用。 Ⅰ.RVM区NTS2受体在CCI模型中的表达变化 实验用坐骨神经慢性压迫伤致神经病理性痛模型大鼠,分别以清醒大鼠对辐射热刺激和机械性触觉刺激的缩腿潜伏期和机械阈值为指标,将实验大鼠分为CCI模型组、假手术组、正常对照组,分别在坐骨神经结扎术前3天和结扎术后14天连续监测大鼠痛阈及行为变化,并选择术后1、4、7、14天的大鼠,采用免疫组化方法观察 RVM区NTS2受体的表达变化与大鼠热痛敏和触诱发痛间的关系; 结果发现: CCI模型组RVM区NTS2受体表达增加可显著增强神经病理性痛大鼠的热痛敏和触诱发痛现象,其促进作用分别在术后第4天(热痛敏)和术后第7天(触诱发痛)达到最大,表现为痛阈最低。同时免疫组化结果显示:术后第4天,光镜水平下CCI模型组表达NTS2免疫阳性细胞数量明显增加,与假手术组术后4天和正常组大鼠相比有显著差异(P<0.01),同时术后第1和7天时,CCI模型组NTS2免疫阳性细胞数量较假手术组相比也有明显差异(P<0.05);并且免疫阳性细胞的平均吸光度与假手术组比较在第1和4天有显著差异(P<0.01),第7天有明显差异(P<0.05)。 Ⅱ.RVM区注射SR142948A对NTS2受体表达和大鼠热痛阈的影响 实验选用术后第4天(大鼠痛阈最低)CCI模型组大鼠于RVM区微量注射NT受体第二代拮抗剂SR142948A或生理盐水,以浅麻醉状态下大鼠对辐射热刺激的术侧缩腿潜伏期和甩尾潜伏期为指标,观察SR142948A注射后对NTS2受体表达和大鼠行为学的影响。 结果发现: RVM区微量注射SR142948A后,大鼠痛阈较注射前有明显增高。并且发现:SR12948A浓度为1nmol时,大鼠痛阈增高,峰值出现在注射后第15min,与注射前基础痛阈相比有明显差异(P<0.05);SR142948A浓度为10nmol时,峰值出现在注射后第10min,与注射前基础痛阈相比有明显差异(P<0.05)。提示随着SR142948A的浓度的增加,痛阈增高峰值出现的时间发生左移现象。同时免疫组化结果显示, RVM区NTS2受体的表达与注射前和生理盐水对照组均无明显差异。 综上所述,本研究在核团水平和细胞水平观察到RVM区的NTS2在神经病理痛条件下免疫阳性神经元的表达上调,而且RVM区注射SR142948A后可明显增加CCI大鼠的热痛阈,均提示RVM区内NTS2受体参与痛觉调制的过程,很可能起到易化痛觉传递的作用。