鼠尾藻光合作用与抗氧化活性分析及培养条件探究

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本文利用了液相氧电极技术、叶绿素荧光技术、抗氧化酶试剂盒以及室内培养等实验方法,根据鼠尾藻生长周期中不同阶段,研究了光照度、温度、盐度、pH和营养盐水平对鼠尾藻的光合特性、生长速率及抗氧化系统的影响。结果表明:(1)光照度为8000lx、温度为20℃和盐度20的条件下生殖托的比生长速率(SGR)与净光合放氧速率(Pn)较大。色素含量与光照度、温度呈显著的负相关性,叶绿素a和类胡萝卜素含量受环境因子影响较大,而叶绿素c相对稳定。适宜生殖托生长的氮、磷比(N/P)范围为5:1~1:1,而50:1显著抑制生殖托的生长。相比氮元素而言,磷浓度变化对生殖托光合作用影响更大,说明磷元素对于生殖托的构建至关重要。结果表明,适宜生殖托培养的条件为光照度8000lx、温度20℃、盐度20、氮磷浓度比(N/P)在5:1~1:1之间。(2)温度和盐度对鼠尾藻幼孢子体的生长影响显著(P<0.05),25℃时幼孢子体比生长速率(SGR)有最大值10.78%,随着温度的降低SGR逐渐降低;盐度30时幼孢子体生长较快,盐度降低SGR也降低;光照度2000lx至8000lx对幼孢子体的生长影响不显著。实验用自然海水中氮素基本可以满足幼孢子体的需求,而磷元素相对缺乏。氮素加富条件下,氮磷比大于15:1时不利于幼孢子体的生长,适宜的氮磷比为10:1~2:1。结果表明,温度25℃、盐度30、光照度2000lx、氮含量0.45~1mg/L,氮、磷比10:1~2:1是鼠尾藻幼孢子体早期生长发育的适宜条件。(3)鼠尾藻叶状幼苗Pn随着光照、温度的升高均表现为先上升后下降。光合放氧光补偿点和光饱和点随着温度的升高而上升。温度在11~26℃,光照在10000lx~16000lx下具有高的Pn。幼苗在暗适应下相对电子传递速率rETR较低,光适应后rETR显著升高;最大相对电子传递速率rETRmax随着温度、光照的升高均表现为先上升后下降,11~21℃,4000~6000lx适应下幼苗rETRmax较大。叶状幼苗在6~16℃范围内,随着温度的升高,比生长速率SGR递增,21℃培养第二周SGR为负值。11~16℃,2000lx~8000lx范围内,SGR随着光照度的上升而递增。结果表明,在21℃下短时间暴露,叶状幼苗具有较高的光合作用能力,但不能长期培养。11~16℃是幼苗适宜的培养温度,培养光照度不应小于4000lx。(4)鼠尾藻直立枝顶端Pn和暗呼吸速率(Rd)显著高于中部与基部(P<0.05)。低光(LL)适应后,叶片重新启动光合作用需要一定的时间,立即照光将会产生光抑制。中光(ML)适应,叶片光化学反应与热耗散达到平衡态。高光(HL)适应下,叶片电子传递速率ETR达到饱和,非光化学淬灭(NPQ)显著升高。顶端与中部ETRmax高于基部。LL、ML适应后,叶片暗弛豫较快,HL适应后,暗弛豫较慢。顶端NPQ恢复较快并能完全恢复至0,说明顶端光修复较快;而中、基部较慢且不能恢复至0,表明光损伤较大。顶端色素含量高于中、基部,顶端叶绿素a含量高于类胡萝卜素,而中、基部类胡萝卜素含量高于叶绿素a。3个部位比生长速率为顶端>中部>基部(P<0.05),说明顶端生长最旺盛,有机物质积累较快。狭形叶前端可以裂开形成囊腔,并最终形成气囊,推测温度是主要诱导因素。(5)pH6.0与pH9.5胁迫处理24h后鼠尾藻直立枝Pn均大幅度下降,48h后均与对照组(pH8.5)差异显著(P<0.05)。pH9.5胁迫处理48h后SOD、CAT活性均显著升高(P<0.05),MDA含量呈先上升后下降趋势。盐度15胁迫处理24h,盐度20与25胁迫处理48h后Pn显著低于对照组(盐度31,P<0.05),胁迫72h后3个处理组Pn有一定幅度的上升。盐度20胁迫处理24h后MDA含量先上升后下降(P<0.05),SOD、CAT活性由24h至48h时有一定幅度的上升。盐度15胁迫处理72h后MDA显著上升(P<0.05),而SOD、CAT活性较低。结果表明,pH胁迫使鼠尾藻光合作用能力降低,强碱性使藻体受到活性氧损伤。盐度15条件下,鼠尾藻抗氧化酶活力较低,当高于15时,抗氧化系统对活性氧有较高的清除能力。本文旨在探究鼠尾藻不同阶段适宜光合作用与生长的条件,为鼠尾藻的科研与生产提供参考。
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