目的：采用密度梯度离心和差速贴壁法对成年Wistar大鼠骨髓间充质干细胞（Mesenechymal stem cells，MSCs）进行体外分离、纯化及培养，探讨MSCs的生物学特性；利用碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）和依达拉奉联合诱导MSCs的方式，探索MSCs体外定向诱导分化为神经元样细胞的条件及其被诱导后的生物学活性；将诱导后的MSCs移植到脊髓损伤动物模型中，评价MSCs移植对受损脊髓的修复作用。
　　方法：选用1月龄健康的雄性Wistar大鼠，采用Percoll分离液密度梯度离心法获取骨髓中的MSCs，通过差速贴壁法反复传代培养、纯化，获得纯度高、生物性状稳定、增殖能力强的细胞株。利用bFGF和依达拉奉联合诱导的方式，通过流式细胞术、扫描电镜、免疫细胞化学方法检测MSCs体外诱导为神经元样细胞的生物学活性；制备移植的MSCs，分别行空白对照组，L-DMEM7d、14d、21d、1M组和MSCs7d、14d、21d、1M组移植。观测指标：① MSCs体外培养及诱导分化后的形态学观察及检测；②细胞移植后的行为学检测；③透射电镜观察超微结构；④ HRP逆行示踪轴突生长情况；⑤免疫组织化学、分子生物学分析。
　　结果：①密度梯度离心和差速贴壁法分离纯化的MSCs经免疫细胞化学及流式细胞仪表面标记物鉴定，细胞特异性的标记物CD44表达阳性，不表达造血干细胞及白细胞的特异性标记物CD34、CD45，细胞纯度高达95.5％。②定向诱导分化后通过扫描电镜可观察到典型的神经元样细胞结构；免疫组织化学检测NSE阳性表达，GFAP不表达。③成功构建大鼠脊髓半横断损伤模型，细胞移植后检测表明，诱导后移植的MSCs可促进神经细胞的轴突再生，且随着饲养时间的延长作用更明显，而移植的L-DMEM组轴突再生不明显，空白对照组大鼠脊髓的功能几乎没有影响。
　　结论：①密度梯度离心和差速贴壁法是一种很好的分离纯化MSCs的方法，可获得高纯度的MSCs。②依达拉奉能高效的定向诱导MSCs分化为神经元样细胞。③诱导分化后的MSCs移植治疗大鼠半横断损伤的脊髓后能显著促进损伤脊髓的功能修复，是脊髓损伤的干细胞移植治疗的理想细胞来源。