目的:腺病毒(AdV)是引起人类呼吸道和消化道感染的重要病原之一,严重威胁着人类的健康。腺病毒感染主要是以3,5,7型为主,,主要引起小儿肺炎,所以建立有效的防治腺病毒感染措施意义重大。腺病毒有三个主要的结构抗原：六邻体、五邻体基底及纤维突起。这三个结构抗原上具有含有型、型间、组特异性抗原表位及中和性抗原表位,但大部分抗原位点在蛋白的一级结构上尚未最后定位。本实验旨在利用生物信息学软件分析、预测已知的腺病毒的51种血清型核酸序列,找出所共有的型间共同的特异性抗原表位,克隆、表达高度保守的片段,为研发多效价的腺病毒疫苗奠定基础。 方法:利用计算机分析软件对HAdV六邻体蛋白、五邻体基底蛋白、纤维突起蛋白的氨基酸序列进行同源性比较分析,结合抗原性的预测结果和这三种蛋白的三维空间结构暴露情况,确定了不同型别腺病毒六邻体、五邻体基地、纤维突起所共有的型间共同的特异性抗原表位,选择了五邻体单体蛋白的基因序列进行克隆。以本实验室分离的腺病毒(HadV)基因组DNA为模板,PCR扩增目的片段,定向克隆构建原核表达质粒pQE30-Penton。 结果:通过生物信息学软件分析后确定五邻体蛋白比较适合研发多效价的腺病毒疫苗,扩增的Penton基因长1649bp,构建了重组质粒pQE30-Penton。 结论:构建了重组质粒pQE30-Penton。为进一步表达、纯化该蛋白做准备,为开发研制预防多型别HAdV感染的多价腺病毒基因工程疫苗奠定了基础。