随着我国畜牧业持续快速发展,以饲喂玉米-豆粕型日粮为主的“杜长大”饲养模式导致“人畜争粮”问题日益突出,寻求具有耐粗饲性能的瘦肉型新猪种以及使用来源广、价格低的本土饲料资源成为解决该问题的重要途径。苏淮猪是我国新近培育成功的瘦肉型猪种,具备其父本大白猪瘦肉率高的特点,又保留其母本淮猪“耐粗”的特性。但其耐粗饲的具体机制尚不清楚,推测与其肠道发育和微生物有关。米糠是我国本土资源丰富的重要能量饲料,虽然粗纤维含量较高,适口性不佳,但我国传统地方猪养殖中长期使用米糠作为饲料原料以节约成本。并且有研究显示米糠具有益生元免疫特性,日粮中添加米糠对猪的肠道免疫有一定影响。但是目前关于苏淮猪是否能有效消化以米糠为主要能量来源的高纤维日粮及其肠道发育和微生物机制尚缺乏系统研究;同时高米糠日粮是否对苏淮猪肠道免疫产生影响也尚不清楚。因此,本文选择日龄(160日龄)、体重(52.60±0.79kg)相近的48头纯种雌性苏淮育肥猪作为研究对象,分为2组,分别饲喂未添加米糠的玉米-豆粕型低纤维日粮和以米糠为主要能量来源的高纤维日粮,饲养75 d。首先研究苏淮猪对两种日粮的消化差异,以及为应对高米糠日粮在肠道结构方面的适应性改变(试验一),再分析高米糠日粮对苏淮猪大肠纤维分解菌及其代谢产物的影响,从后肠微生物角度探究其高纤维降解潜在机制(试验二),最后研究高米糠日粮导致的苏淮猪肠道免疫效应(试验三)。1高米糠日粮对苏淮猪肠道消化和发育的影响分别在饲养期第0 d、14 d、28 d采集粪便样品,测定粗纤维消化率;在第75 d试验期结束,所有试验猪全部屠宰,分别测量胃、小肠及大肠重量及长度;并截取十二指肠、空肠、回肠和结肠组织样,用于肠道组织形态学观察。结果显示,在试验第14d,试验组粗纤维消化率(P<0.05)和中性洗涤纤维消化率(P<0.01)显著增高,到试验第28d,试验组和对照组粗纤维表观消化率无差异(P<0.05),说明高米糠日粮能够短期内促进苏淮猪对粗纤维的消化,并且经过两周适应期,粗纤维消化率恢复。接着试验第75 d对苏淮猪肠道发育进行检测,发现除高米糠日粮组小肠相对重量以及小肠重量在整个肠道重量的比重降低(P<0.05),大肠重量在整个肠道重量的比例增加(P<0.05)外,饲喂高米糠日粮对苏淮猪胃肠道重量和长度的其余指标均没有显著影响,说明高米糠日粮对苏淮猪肠道重量和长度的发育影响不大。肠道形态学观察结果显示,与对照组相比,米糠试验组的十二指肠(P<0.01)和空肠(P<0.05)绒毛高度均显著增加,对四段肠的其他指标没有显著影响,说明高米糠日粮可以改善肠道上皮微绒毛结构。2苏淮猪适应高米糠日粮的纤维分解菌及其代谢产物特性分别在饲养期第0d、14 d、28 d和屠宰前(第75 d),体外收集粪便样品,用于纤维分解菌数量测定以及羧甲基纤维素酶(Carboxymethyl cellulase,CMCase)活性检测;在屠宰后,分别收集盲肠、结肠及直肠内容物样品,测定VFA含量。通过荧光定量PCR对苏淮猪粪便纤维分解菌进行定量分析结果表明,在试验第14 d,高米糠日粮组的黄化瘤胃球菌数量显著升高(P<0.05),之后在28 d和75 d,试验组与对照组之间黄化瘤胃球菌数量没有显著差异;柔嫩梭菌数量在试验第14 d及28 d均没有变化,直至在试验结束时,试验组数量显著高于对照组(P<0.05);而在整个试验期内,试验组白化瘤胃球菌数量一直没有显著变化,说明高米糠日粮可以刺激苏淮猪肠道纤维分解菌增加。通过DNS法测定苏淮猪粪便CMCase活性结果发现,在试验第14 d,试验组的CMCase活性极显著高于对照组(P<0.01),随后在试验第28 d及试验第75 d,与对照组无差异,说明高米糠日粮在第14 d引起苏淮猪CMCase活性增加,而食糜羧甲基纤维素酶活性,可以间接反应纤维分解菌活力,间接说明其纤维分解微生物活性增加。最后,测定盲肠、结肠和直肠挥发性脂肪酸(VFA)含量发现,与对照组日粮相比,高米糠日粮显著提高了苏淮猪盲肠内容物中乙酸/丙酸比值(P<0.05);显著增加结肠中丙酸浓度(P<0.05)以及乙酸/丙酸比值(P<0.01)、增加乙酸/丁酸比值(P<0.05);还显著降低了直肠异丁酸、异戊酸以及支链脂肪酸浓度(P<0.01),说明米糠替代部分玉米对苏淮猪大肠VFA的产量有影响,且不同VFA指标在不同肠段内变化情况不同。3高米糠日粮对苏淮猪肠道免疫健康的影响分别在饲养期第0d、14 d、28 d和屠宰前(第75 d),体外收集粪便样品,测定双歧杆菌、乳酸杆菌和大肠杆菌的数量;屠宰时,测定胃、各段小肠和大肠pH值;采集十二指肠、空肠、回肠、盲肠和结肠各肠段黏膜,测定黏膜中白细胞介素1β(IL-1β)、白细胞介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)含量;利用小肠组织样,测定肠道杯状细胞数量。结果显示,在试验第28 d,高米糠日粮组双歧杆菌、乳酸杆菌和大肠杆菌数量与对照组相比均显著增加(P<0.05),到试验期结束,三种菌数量与对照组水平无差异,暗示饲喂米糠纤维带来的苏淮猪肠道内乳酸杆菌、双歧杆菌和大肠杆菌的改变具有弹性和瞬时性。在试验结束,高米糠日粮组胃肠道pH均无显著变化;而除十二指肠杯状细胞数量极显著增加(P<0.01)外,其余肠段杯状细胞数量均无显著变化;饲喂高米糠日粮对各肠段促炎性细胞因子(IL-1β、IL-6、TNF-α)的表达量均没有影响。以上结果说明米糠替代部分玉米形成的高纤维日粮对苏淮猪肠道免疫健康起到一定积极作用,且具有时效性。综上,利用米糠替代部分玉米的高纤维日粮饲喂苏淮猪,对其肠道发育有一定促进作用,并且可以通过调控纤维分解菌丰度和纤维分解酶活性高效消化利用纤维日粮,高米糠日粮虽然对苏淮猪肠道黏膜免疫无显著影响,但有利于乳酸杆菌和双歧杆菌等肠道益生菌的繁殖。说明苏淮猪可以良好适应35%的米糠高纤维日粮,在今后我国地方猪或含地方猪血统的新猪种养殖中利用米糠替代部分玉米具有初步可行性。