论文部分内容阅读
姜黄(Curcuma longa L.)是姜科(Zingiberaceae)姜黄属多年生草本植物,姜黄素是一种多酚类天然活性物质,主要存在于姜黄根状茎中。姜黄素具有抗炎、抗病毒、抗氧化、抗肿瘤、治疗神经性疾病等多种药理学作用,具有良好临床应用前景,但姜黄素存在水溶性较差、生物利用度低和半衰期短等性质限制其开发与应用。本研究旨在解决姜黄素溶解度低及生物利用度低的缺点,通过姜黄分别与甘草、黄芪和当归配伍,分析配伍后姜黄中姜黄素含量及其生物活性的变化,同时,考察甘草酸对姜黄素的增溶作用及姜黄素联合顺铂对癌细胞的抑制作用,确定姜黄素与顺铂联用的最佳比例,进而制备姜黄素复合纳米脂质体并进行生物活性评价,为姜黄素复合纳米脂质体的应用提供一定理论依据,具体研究结果如下:1、姜黄配伍的生物活性研究。姜黄分别与甘草、当归和黄芪配伍后,比例为1︰1.2时,三种配伍的姜黄素含量均达到最大值,姜黄素含量分别为8.79mg·g-1、7.08 mg·g-1和7.44 mg·g-1;姜黄配伍甘草为1︰0.4、配伍当归为1︰1.6、配伍黄芪为1︰1.6,对DPPH·和ABTS·+自由基的清除率均达到最大值,其中姜黄配伍甘草1︰0.4时抗氧化活性最高,对DPPH·和ABTS·+自由基清除率分别为89.58%和83.27%。姜黄配伍甘草比例为1︰2、配伍当归比例为1︰1、配伍黄芪比例为1︰2,对枯草芽孢杆菌和金黄色葡萄球菌的抑制率效果较好,其中,增强姜黄抗菌能力最好的为姜黄配伍黄芪,相对抑菌率为42.89%和28.34%。姜黄与甘草配伍比例为1︰0.4、配伍当归比例为1︰1、配伍黄芪比例为1︰2,对乳腺癌细胞MDA-MB-231和肺癌细胞H460两种癌细胞的增殖抑制率较好,其中,增强姜黄配伍甘草抗肿瘤能力最好,细胞抑制率为41.67%和51.08%。2、姜黄素增溶作用及其联合顺铂抗肿瘤活性。研究结果表明:10 mmol·L-1甘草酸能最大程度提高姜黄素溶解度,比对照增加607倍;25℃水浴下和50%乙醇能促进甘草酸溶液中姜黄素的溶解;甘草酸的临界胶束浓度为0.65 mmol·L-1。姜黄素和顺铂对肝癌细胞HepgG2增殖均具有抑制作用,且随浓度增加,抑制率不断升高;顺铂与姜黄素联用对肝癌细胞HepgG2增殖的抑制效果增加,两者比例为1︰8,对肝癌细胞HepgG2增殖抑制效果最好。3、姜黄素复合纳米脂质体生物活性研究。运用薄膜分散法、乙醇注入法和逆向蒸发法制备姜黄素复合纳米脂质体,薄膜分散法制备的粒径分布更均匀,呈现规则圆球型,分散程度更好;脂质体水合粒径为359 nm,电位为-46.81 mV,带负电荷;制备的脂质体形状规则且具有较好包封率。姜黄素复合纳米脂质体生物活性表现出优于抗坏血酸的抑制效果,100μg·mL-1脂质体抗氧化效果最强,对DPPH·和ABTS·+自由基的清除率分别为53.89%和97.89%;1000μg·mL-1姜黄素复合纳米脂质体的综合抑菌效果最好,对大肠杆菌和枯草芽孢杆菌的抑制率分别为18.00%和21.88%,对粉红单端孢和香蕉枯萎病的抑制率分别为10.67%和33.56%;12.5μmol·L-1姜黄素复合纳米脂质体对肝癌细胞HepG2和肺癌细胞H460的增殖抑制率分别为86.67%和78.98%。