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目的:探讨研究光氧化反应处理后的牛颈静脉带瓣管道的外观形态、组织稳定性及流体物理性能的特征,及体外的抗钙化性能。
方法:取新鲜牛颈静脉带瓣管道24根,分为光氧化反应处理组、戊二醛固定处理组及新鲜对照组。分别观察和测量各组固定处理前后的管壁的厚度、管腔外径及各组管道瓣膜的抗返流功能的变化,测定处理前后的组织含水量、热皱缩温度、最大应力,并作各组的组织蛋白提取分析以了解组织稳定性。通过建立大鼠皮下包埋动物模型,加速体内钙化的实验方法;应用原子吸收光谱法测定大鼠皮下包埋后组织的钙含量;vonkossa钙盐染色观察组织钙化情况;并对比研究包埋后组织的光镜及电镜结构变化。
结果:光氧化反应组与新鲜对照组相比管壁厚度、管腔外径、瓣膜抗返流功能、组织含水量及热皱缩温度差异无统计学意义(p>0.05),与戊二醛固定组相比差异有统计学意义(P<0.05);光氧化反应组最大应力大于新鲜对照组,低于戊二醛组;光氧化反应组和戊二醛固定组的组织蛋白提取量均少于新鲜对照组;光氧化反应组的钙含量低于戊二醛固定组。
结论:光氧化反应的处理方法,与传统的戊二醛固定方法相比较,能较好地保持牛颈静脉带瓣管道原有的管壁及瓣膜结构的完整性,并可提高牛颈静脉管道的组织稳定性和组织的断裂强度及体外抗钙化性能。
第二部分光氧化处理的牛颈静脉带瓣管道重建犬右心室-肺动脉连接实验研究目的:研究光氧化反应处理的牛颈静脉带瓣管道用于重建犬右室-肺动脉连接后,在体内循环系统中与血流接触的条件下的抗钙化性能及其血流动力学性能。
方法:本研究以经光氧化反应处理的牛颈静脉带瓣管道为研究对象,以单纯戊二醛交联固定的牛颈静脉带瓣管道作为对照,建立犬重建右心室-肺动脉连接的动物模型;实验动物饲养观察10个月后,通过超声心动图检查、心导管检查等方法评价二种不同方法固定处理的牛颈静脉带瓣管道重建犬右心室-肺动脉连接后的血流动力学性能,并了解牛颈静脉管道内的瓣膜在犬的右心系统内的功能。屠宰实验动物后取出标本,通过原子吸收光谱法测定组织钙含量,vonkossa钙盐染色观察组织钙化情况,以评价在体内循环系统中与血流接触的情况下,对比研究二种不同方法处理的牛颈静脉带瓣管道的抗钙化性能。
结果:心脏超声显示两组管道均通畅,瓣叶活动良好。光氧化处理组术中结扎肺动脉前、后直接测压及术后9-10个月通过心导管测压,所测得的跨瓣压差维持在较低水平,特别是术后9-10个月,心导管测得跨瓣压差无明显升高;光氧化处理组术中结扎肺动脉前、后及术后9-10个月测得的右室舒张压均保持低水平;戊二醛组管道于术中结扎肺动脉前、后及术后9-10个月测得跨瓣压差其结果与光氧化组管道相似。光氧化组管道血管壁钙含量为7.60±8.02ug/mg,戊二醛组管道血管壁钙含量为22.05±10.78ug/mg,统计学上有显著性差异(P<0.05);光氧化组和戊二醛组管道瓣膜钙含量分别为0.74±0.23ug/mg和0.88±0.69ug/mg,二者相比无统计学差异(P>0.05)。
结论:1、光氧化反应处理固定的牛颈静脉带瓣管道可用于重建右室-肺动脉连接,血流动力性能良好,与自体肺动脉相当,远期血流动力学性能尚待进一步观察研究。2.光氧化反应处理固定的牛颈静脉带瓣管道在狗的动物模型中,抗钙化性能好于戊二醛固定的牛颈静脉管道。