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当前,环境内分泌干扰物引起的生态效应已经人类的极大关注。由于环境内分泌干扰物种类多样,并且在环境中存在水平极低,为化学检测带来困难。因此,为了评价和理解环境内分泌干扰物的污染状况及潜在的危害,生物检测方法越来越受到人们的重视。在对内分泌干扰物的研究中,目前已经建立检测特异标志物--卵黄蛋白原的ELISA方法,但是主要针对的是模式生物(鱼类),不能很好地反映现实环境。为此,我们以鲫鱼和梭鱼作为潜在的环境指示生物,建立了卵黄蛋白原检测方法,并将这些方法应用到了实际环境中内分泌干扰物质的生物效应的检测。主要取得了如下研究结果。
为了以卵黄蛋白原作为生物标志物反映内分泌干扰物的累积污染和即时污染,本文先后建立了检测鲫鱼卵黄蛋白原蛋白的ELISA方法和检测卵黄蛋白原mRNA实时定量RT-PCR方法,以及检测梭鱼卵黄蛋白原mRNA的实时定量RT-PCR方法。
(2)在研究城市污水处理厂排水中内分泌干扰物诱导卵黄蛋白原效应时,发现城市污水处理厂具有很强的诱导鲫鱼卵黄蛋白原升高的效应,随着暴露时间的延长效应越强,并且诱导下游河道野生鲫鱼产生高浓度水平的卵黄蛋白原,说明目前的城市污水处理技术还无法保障出水的水质安全。
(3)以梭鱼作为环境指示生物对渤海的内分泌干扰物的诱导卵黄蛋白原效应进行研究,调查结果显示当前渤海内分泌干扰物的长期和即时污染已经非常严重,不仅显著诱导梭鱼产生卵黄蛋白原蛋白和mRNA表达,并且已经导致梭鱼性腺发生高比例的雌雄同体,这将影响到梭鱼的正常繁殖。