前言间质性肺疾病的发病率不断增高,已经成为威胁人类健康的一种重要疾病。结节病(SAR)和外源性过敏性肺泡炎(EAA)是间质性肺疾病(ILD)中较为重要的两种,发病机制目前尚未完全明确,越来越多的研究表明细胞因子,特别是致炎性因子可能在两种疾病的发生、发展过程中,起着非常重要的作用。现在已有20余种细胞因子被证明与ILD有关。白细胞介素是其中较为重要的能作用于多种靶细胞的炎症性单核细胞因子。白细胞介素4(IL-4)、白细胞介素2(IL-2)分属于两个不同类型的细胞因子。Th1型细胞因子与Th2型细胞因子的比例失衡在ILD中的作用越来越为人们所重视。本研究的目的就是探讨IL-4、IL-2在ILD进程中所起的作用和它们的临床意义,以期待对ILD的发病机制有更全面的认识。实验材料1、研究对象(1)SAR组:SAR组患者24名,所有患者均经临床、肺功能检查、血气分析、肺HRCT检查,并经支气管肺泡灌洗检查(BAL)和经支气管肺活检(TBLB)除外其他间质性肺疾病。符合美国胸科学会(ATS)和欧洲呼吸学会(ERS)共同提出的有关SAR的非创伤性标准。(2)EAA组:所有患者均经临床、肺功能检查、血气分析、肺HRCT检查,并经支气管肺泡灌洗检查(BAL)和经支气管肺活检(TBLB)除外其他间质性肺疾病。所有患者检查前未经糖皮质激素及其它免疫抑制剂治疗。2、实验仪器Olympus260型纤维支气管镜,Universal32R离心机,BIO-RAD酶标仪。3、实验试剂IL-4和IL-2试剂盒均购自上海吉泰生物医学公司。实验方法1、应用Olympus260型内径5.9mm的电子支气管镜做支气管肺泡灌洗。2、BALF用2层的无菌纱布过滤后注入经高压消毒的塑料离心管中,离心后注入无菌透析袋,浸入50%的聚乙二醇溶液中,24小时后加入生理盐水(量为原BALF量的1/10),取浓缩液封盖冷冻保存(-70℃)备用。于支气管肺泡灌洗后立即采肘静脉血素3ml,对静脉血进行离心,取上清冷冻保存(-70℃)备用。检测时取其上清进行IL-4和IL-2水平测定。3、用酶联免疫吸附测定法检测血清和BALF中IL-4和IL-2水平。4、统计学处理:所得数据以x±s表示,采用spss软件包行t检验。实验结果SAR组与EAA组BALF及血清中IL-4、IL-2的水平及比较。EAA组患者外周血中IL-4水平明显高于SAR组外周血中IL-4水平。SAR组外周血IL-2水平与BALF中的N%呈正相关,EAA组BALF中IL-4水平与M%呈正相关。讨论虽然引起ILD的发病机理目前尚未完全明确,但是进来研究人员对ILD的发病机制已有了越来越深入和广泛的了解。研究表明,在某种致病因素的作用下,细胞因子特别是致炎性因子可能在本病的发生、发展过程中起着非常重要的作用。现在已有20余种细胞因子被证明与ILD有关。白细胞介素是其中较为重要的能作用于多种靶细胞的炎症性单核细胞因子。IL-4是特征性Th2型细胞因子,IL-2为重要的Th1型细胞因子。Th1型细胞与Th2型细胞的比例失衡在间质性肺疾病中的作用越来越为人们所重视。研究表明,Th2细胞来源的因子如IL-4等可扩大炎症反应引起肺结构重塑,刺激肺成纤维细胞增生伴胶原和纤维素沉积增多引起肺泡壁基底膜增厚和弥漫性上皮下纤维化。研究发现,损伤的肺泡上皮细胞高表达IL-4,IL-4是成纤维细胞的趋化因子,诱导成纤维细胞增殖并增加细胞外胶原生成,且通过抗凋亡作用促进纤维化。我们的研究结果显示:SAR组患者的BALF中IL-2及IL-4水平与EAA组患者差别无显著性。SAR患者的外周血中的IL-4水平明显低于EAA组。说明IL-4的增高是一种全身行为。IL-2主要由活化的巨噬细胞、树突状细胞和中性粒细胞产生,有致炎和免疫调节作用。在Th细胞亚群的分化中发挥重要作用,是Th1细胞生长所必需的细胞因子,可以促使Th1细胞的增殖分化产生Th1型细胞因子,抑制Th2细胞的增殖分化。IL-2可以诱导活化的T细胞和NK细胞分泌IFN-γ和TNF。通过本实验观察SAR患者BALF中IL-4水平与EAA组中的IL-4水平无明显差异(P＞0.05),而外周血中的IL-4水平明显低于EAA组(P＜0.01),这种现象说明EAA患者Th1型细胞因子减少,SAR患者Th1型细胞因子增高是一种局部现象而非全身性,同时也在一定程度上说明Th1型细胞因子IL-2可以抑制成纤维细胞的增殖和纤维组织的生成。总之,越来越多的证据表明:Th1/Th2型细胞因子平衡失调,导致肺泡的炎症损伤和修复,在肺间质疾病过程中起着重要的作用。结论1、Th1/Th2型细胞因子平衡失调,导致肺泡的炎症损伤和修复,在肺间质疾病过程中起着重要的作用。2、SAR患者Th1型细胞因子IL-2的变化只发生在肺组织局部,而Th2型细胞因子IL-4的变化是一种全身性行为。这种变化在EAA的治疗方面具有一定的指导意义。