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本研究以危害黄瓜的枯萎病菌为研究对象,采用提取、萃取、柱层析等分离方法,对广泛分布于世界各地的植物—百里香进行了活性成分分离,获得了活性流份L3,并对其抑菌机理进行了研究,试验结果如下:1.用三种溶剂对百里香粉末进行提取,提取率最高的为乙醇,氯仿次之,石油醚最低。同时测定了各提取物对黄瓜枯萎病菌生物活性,结果表明:百里香乙醇粗提物和石油醚粗提物在72h和48h对供试菌的菌丝生长和孢子萌发都有较强的抑制作用,而百里香氯仿提取物的抑制效果较差。浓度为2mg·mL-1时,对菌丝的抑制率和对孢子萌发抑制率,乙醇提取物分别为75.98%和95.70%。72h时对菌丝生长的EC50为0.82mg·mL-1,48h对孢子萌发的ECso为0.43mg·mL-1。所以,选用百里香乙醇提取物进行进一步分离。2.对百里香乙醇提取物四种不同萃取物的研究结果表明:萃取率由高到低依次为氯仿(29.00%)、甲醇(15.75%)、乙酸乙酯(12.12%)、石油醚(10.30%)。对萃取物进行生物活性跟踪测定表明,石油醚萃取物对黄瓜枯萎病菌菌丝和孢子萌发抑制作用最高,分别为81.2%和93.82%。72h时对菌丝生长的EC50为0.71mg·mL-1,48h对孢子萌发的EC50为0.45mg·mL-1。3.将石油醚萃取物经柱层析分离以及薄层层析检测后,合并相同的流分,得到13个流分,对所得13个流分进行生物活性测定表明,L3对病原菌菌丝有很高的生物活性,在72h时抑制率为92.49%。4.L3处理黄瓜枯萎病菌菌丝后,经显微观察发现,菌丝变形、增粗;在电镜下菌丝干扁、皱缩,可能是影响了细胞膜和细胞壁的形成。5.通过L3处理黄瓜枯萎病菌菌丝后,在测定细胞膜渗透性中发现,L3增大了菌丝细胞膜渗透性,导致电解质渗漏;对细胞膜上麦角甾醇含量测定中,L3显著抑制了其合成,说明L3在病原菌的细胞膜上存在作用位点。同时在对细胞壁中的几丁质酶活性测定中,发现L3在2mg·mL-1,3h后,对几丁质酶活性最高,可能造成细胞壁上的几丁质水解,使得真菌细胞壁不完整,或降解。在对黄瓜幼苗灌根后,幼苗体内SOD、CAT和POD活性也有所提高,这说明百里香乙醇提取物能诱导SOD、CAT和POD酶活性提高,有效提高黄瓜幼苗的抗病性。6.在盆栽试验中,4mg·mL-1百里香乙醇提取物对黄瓜枯萎病的保护和治疗作用达70.11%和68.64%。根据试验研究结果,百里香提取物有很好的抑菌活性,有很好的开发前景。