论文部分内容阅读
本论文分别以2,3,7,8-四氯二苯并二噁英(2,3,7,8-tetrachlorodibenzo-P-dioxin,TCDD)和3,3,4,4-四氯联苯(3,3,4,4-tetrachlorobiphenyl,PCB77)对斑马鱼(Brachydanio rerio/Danio rerio)组织结构的影响为切入点,找出这2种二噁英类化合物(dioxin-like compounds,DLCs)作用于斑马鱼的靶器官,研究2种DLCs对斑马鱼肝脏脂质过氧化作用及CYP1A蛋白的诱导,探索DLCs的毒性作用与斑马鱼肝脏脂质过氧化作用、CYP1A蛋白的诱导之间的内在联系,为进一步研究DLCs的分子毒理机制提供理论依据。试验根据染毒物质及剂量的不同将斑马鱼分成10组:TCDD染毒组(染毒剂量分别为0.1μg/L、0.2μg/L、0.4μg/L和0.8μg/L)和空白对照组:PCB77染毒组(染毒剂量分别为0.1 mg/L、0.2 mg/L、0.4 mg/L和0.8mg/L)和空白对照组,采用水浴染毒,水温控制在25~28℃。分别进行如下研究:(1)研究TCDD和PCB77对斑马鱼组织结构的影响;(2)研究TCDD和PCB77对斑马鱼肝脏MDA含量、SOD和GST活性的影响,分析其脂质过氧化作用;(3)研究TCDD和PCB77对斑马鱼肝脏CYPlA蛋白的诱导作用。试验结果表明:病理组织学检查发现,染毒7d后,TCDD和PCB77分别对斑马鱼的肝脏有着明显的毒性作用,能引起肝细胞核移位偏离中心,细胞破裂溶解等现象。TCDD和PCB77还能引起斑马鱼肠道上皮细胞的坏死、微绒毛减少,心肌细胞发生不同程度的变性,脾脏淋巴细胞排列疏松、坏死溶解等。但对斑马鱼的脑组织结构无明显影响。肝脏脂质过氧化作用明显,染毒5d后,与对照组相比,TCDD各染毒组MDA含量增加,其中0.2μg/L、0.4μg/L、0.8μg/L组差异显著(P<0.05);各染毒组SOD活力下降,其中0.2μg/L、0.4μg/L、0.8μg/L组差异显著(P<0.05);各染毒组GST活力下降,且都差异显著;PCB77各染毒组MDA含量增加,其中0.2mg/L、0.4mg/L、0.8mg/L组差异显著(P<0.05);各染毒组SOD活力下降,且都差异显著;各染毒组GST活力下降,其中0.2mg/L、0.4mg/L、0.8mg/L组GST活力明显下降(P<0.05)。
利用酶联免疫吸附法测定肝脏CYP1A蛋白水平的试验结果显示,染毒7d后,与对照组相比,TCDD各染毒组肝脏的CYP1A蛋白含量都有所增加,其中0.1μg/L、0.2μg/L组差异不显著(P>0.05),0.4μg/L、0.8μg/L组差异显著(P<0.05)。PCB77各染毒组肝脏的CYP1A含量也都有所增加,其中0.1mg/L、0.2mg/L组差异不显著(P>0.05),0.4mg/L、0.8mg/L组差异显著(P<0.05),0.8mg/L组斑马鱼肝脏CYP1A蛋白含量明显高于其它各染毒组(P<0.05)。本研究得到如下结论:1.斑马鱼的肝脏是TCDD和PCB77分别发挥毒性作用的重要靶器官。2.TCDD和PCB77分别能导致斑马鱼肝脏MDA含量增加,SOD和GST活力降低。TCDD和PCB77分别能通过脂质过氧化作用而发挥对斑马鱼的毒性作用。3.TCDD和PCB77分别能诱导斑马鱼肝脏CYP1A蛋白的表达,通过对CYP1A的诱导表达而发挥其毒性作用。