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目的应用免疫组织化学方法观察Sox2和Cdx2在胃癌及其癌前病变组织中的表达,分析其与胃癌临床病理特征的关系,比较分析Sox2和Cdx2与MUC5AC、MUC2/Villin表达的关系,探讨Sox2、Cdx2异常表达在胃癌发生发展中的作用机制及相互关系。材料与方法1、临床病例资料收集中国医科大学附属第一医院肿瘤外科手术切除胃癌标本257例,其中男134例,女123例:年龄20～80岁,中位年龄60岁。每例均取原发灶胃癌组织,其中取远癌正常粘膜205例,肠上皮化生病灶127个,不典型增生病灶100个。257例胃癌中肠型胃癌103例,弥漫型胃癌130例,混合型胃癌24例。组织学分型:乳头状腺癌6例,高分化管状腺癌19例,中分化腺癌78例,低分化腺癌107例,未分化癌4例,印戒细胞癌19例,粘液腺癌24例。临床病理分期:早期胃癌19例,进展期胃癌238例。伴淋巴结转移176例,无淋巴结转移81例。所有患者术前均未做化、放疗,临床病理资料完整。2、实验方法采用EVISION免疫组织化学染色方法、免疫双染法和HID-ABpH2.5-PAS粘蛋白组织化学染色法,观察Sox2、MUC5AC、Cdx2、MUC2和Villin在胃癌及其癌前病变中的表达,分析它们表达的相互关系。3、结果判定Sox2和Cdx2主要在细胞核上表达;MUC2、MUC5AC和Villin主要在细胞浆内表达。免疫组化结果由两位观察者采用盲法每个病例随机选择2个有代表性的高倍视野,计数200个细胞,按照阳性细胞数占同类细胞数的比例,进行等级划分。结果采用半定量计分法判定,以染色强度与阳性细胞的百分比的乘积作为半定量标准。即A:按阳性着色程度评分0分为无色;1分为黄色;2分为棕黄色;3分为棕褐色(深浅与背景色相对比)。B:按阳性细胞所占比例评分,0分:＜5%;1分:6%～25%;2分:26%～50%;3分:51%～75%;4分:＞75%。两者乘积:0分为阴性(-);1～4分为弱阳性(+);5～8分为中度阳性(++);9～12分为强阳性(+++)。在粘蛋白染色的结果中硫粘蛋白呈深棕色;唾液酸粘蛋白蓝染;中性粘蛋白红染。4、统计分析本研究所有数据均采用X~2检验比较各组间率的差异,应用Kendall’s tau-b等级相关检验分析等级相关性。P＜0.05视为差异有统计学意义。所有数据均应用SPSS11.5统计学系统软件分析处理。结果1、Sox2和MUC5AC在正常胃粘膜中的阳性表达率显著高于胃癌组织中的阳性表达率(P＜0.05),在肠上皮化生组织中的阳性表达率明显高于胃癌组织的阳性表达率(P＜0.01),异型增生病变组织中Sox2和MUC5AC蛋白的表达率也高于胃癌组织的阳性表达率(P＜0.01),异型增生和肠上皮化生组织中的阳性表达率也存在差异(P＜0.05)。弥漫型胃癌中Sox2、MUC5AC的表达显著高于肠型胃癌(P＜0.05)2、Cdx2、MUC2蛋白在胃癌组织中的阳性表达率明显高于正常胃粘膜中的阳性表达率,P＜0.05;在肠上皮化生组织中的阳性表达率显著高于胃癌组织的阳性表达率(P＜0.01);异型增生组织中的阳性表达率与胃癌组织间无差异(P＞0.05)。Villin蛋白在胃癌组织中的表达率高于正常胃粘膜中的表达率P＜0.05);肠上皮化生组织中的阳性表达率也高于胃癌组织和正常胃粘膜中的阳性表达率(P＜0.05)。肠型胃癌中Cdx2、MUC2、Villin蛋白的表达水平高于弥漫型胃癌(P＜0.05)3、胃癌组织中Sox2蛋白的表达与大体分型、浸润深度和淋巴结转移密切相关(P＜0.05);MUC5AC的表达与患者的性别、淋巴结转移、浸润深度密切相关(P＜0.05);Cdx2蛋白的表达与浸润深度和组织学分型密切相关(P＜0.05);MUC2蛋白的表达大体分型、浸润深度、组织学分型密切相关(P＜0.05);Villin蛋白的表达与浸润深度和淋巴结转移密切相关(P＜0.05)。4、在胃癌组织中Sox2与Muc5a、Cdx2与MUC2/Villin之间的表达都呈正相关(P＜0.05),Sox2的表达与Cdx2的表达呈负相关(P＜0.05)。结论1、Sox2在正常胃粘膜中阳性表达最高,随着胃粘膜的肠化生,Sox2的表达逐渐减少,提示Sox2对胃表型的维持起重要的作用。在弥漫性胃癌中Sox2的表达明显高于肠型胃癌中Sox2的表达,提示Sox2可能与弥漫型胃癌的发生更为密切。2、Cdx2在肠化生中的阳性表达最高,提示Cdx2对肠表型的维持起重要作用。在肠型胃癌中Cdx2的表达明显高于弥漫型胃癌中Cdx2的表达,提示Cdx2可能与肠型胃癌的发生更为密切。3、Sox2与Cdx2的表达呈负相关,提示Sox2和Cdx2可能在肠上皮化生和胃癌的发生中起重要的作用。