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组织工程是解决损伤修复和实现组织再生最有效的手段之一。然而,临床试验表明移植物常常因缺少新生血管以致无法提供足够的氧气和营养物质而导致修复失败。本论文旨在研究2-N,6-O-磺化壳聚糖(26SCS)与VEGF之间协同促进体内体外血管化作用。在此基础上,设计了一种26SCS介导的VEGF传输系统,并进一步探讨了其理化特性、生物相容性及体外促血管化作用。论文围绕上述内容开展了以下研究: (1)26SCS与VEGF相互作用及其促进血管新生性能的研究 本文研究了26SCS与VEGF的相互作用及其对于VEGF促进血管新生性能的协同作用。系统考察了不同浓度26SCS存在下,VEGF对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)增殖、划痕修复(细胞迁移)、体外芽体发生等细胞行为的影响,以及血管化相关因子基因表达。结果显示26SCS能协同VEGF显著促进HUVECs的细胞活性,其促进效果甚至超过同浓度下的肝素。并且26SCS的这种促进作用与其浓度相关,表现为低促高抑。通过VEGFR2表达、胞内NO分泌实验初步阐述了26SCS协同VEGF促进血管新生、内皮细胞增殖的原因。通过鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)实验证实了26SCS协同VEGF能在胚胎发育期显著促进血管新生。使用明胶海绵固载VEGF及不同浓度的26SCS,采用小鼠皮下植入模型分别在7天和14天观察26SCS和VEGF共同作用促进血管化的情况。HE病理学分析和CD31免疫组化结果显示26SCS协同VEGF可明显促进损伤区域的血管网络重建。 (2)26SCS改性PLGA多孔微球支架的制备及其促进VEGF介导的血管新生研究 快速并可控的血管化依旧是组织工程修复中的短板。本研究通过热成型的方式制备并表征了26SCS表面改性PLGA多孔微球支架,用作VEGF的载体。由于支架表面丰富的多级微孔结构以及VEGF和26SCS之间密切的亲和力作用,26SCS改性PLGA支架(S-P LGA)有利于VEGF的固载,并且可延长释放时间。使用HUVECs作为体外细胞模型,载有VEGF的S-PLGA支架表现出了较好的细胞活力和粘附效果。通过胞内NO分泌和体外毛细管生成实验证明支架上释放的VEGF具有良好的生物活性,并且能与26SCS协同表现出了更好的促血管生成能力。该制备方法可为未来设计促血管化支架提供新的研究思路。