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背景肝细胞癌(HCC)是原发性肝癌中最常见的组织学类型,也是我国常见恶性肿瘤之一。肝癌的发生是一个多因素参与、多步骤累积的复杂过程,包括癌基因的激活和抑癌基因的失活,但其具体分子机制尚不清楚。因此,研究肝细胞癌中的基因异常表达对于阐明肝癌发生机制具有重要意义。plk1是有丝分裂过程中的一种重要激酶,在细胞周期过程中发挥多种作用。近年来,plk1与肿瘤的关系日益受到人们的关注,目前已在食管癌、胃癌、肝癌、结直肠癌等多种实体肿瘤组织中检测到plk1蛋白的过表达,且plk1蛋白的过表达与肿瘤患者的低存活率之间有显著的相关性,但是plk1在肿瘤中过表达的机制目前还不清楚。一些研究发现,细胞周期抑制因子p21WAFI/CIPI可以直接作用于plk1基因启动子区,抑制plk1基因的表达,提示肿瘤组织中plk1蛋白的过表达可能与p21蛋白有关。本试验采用Western-blot方法检测10对肝细胞癌组织中p21和plk1蛋白的表达,并在HepG2细胞水平观察p21过表达对plk1蛋白和mRNA的改变,探讨我国肝细胞癌组织中p21和plk1蛋白表达的相关性,为了解肝细胞癌的发生机制提供新的实验依据。目的细胞周期抑制因子p21WAFI CIPI(p21)可在转录水平抑制polo-like kinase1(plk1)基因的表达,本文诣在探讨plk1和p21WAFI CIPI(p21)蛋白在肝细胞癌中的表达及相关性。材料与方法1.组织标本10例肝癌组织及配对癌旁组织标本取自于河南省肿瘤医院手术切除标本,经病理证实诊断为原发性肝细胞肝癌。癌旁组织取自癌旁5cm以外的非肿瘤肝组织,组织标本离体后,立即置于液氮中冷冻备用。所有肝癌患者均为男性,年龄在45-55岁之间,平均年龄为51±11.53岁。上述样本取材前均经患者知情同意。2.试验方法应用Western方法检测10对肝癌和配对癌旁组织中p21和Plk1两种蛋白的表达情况。通过将pflex-p21表达质粒瞬时转染人肝癌细胞系HepG2细胞,进一步检测p21过表达对p1klmRNA和蛋白表达的影响。3.统计学分析采用SPSS1 1.5软件进行t检验,定义p<0.05为差异有统计学意义。结果与癌旁组织相比,plk1在10例肝癌组织中的表达都高于癌旁组织,p21在7例肝癌组织中的表达高于配对癌旁组织。而在3例肝癌组织中的表达与配对癌旁组织没有明显差异。人肝癌细胞系HepG2细胞转染pflex-p21表达质粒及对照质粒pFlex后plk1在蛋白水平和mRNA水平的表达没有明显变化。结论1.plk1和p21蛋白在肝癌组织中的表达分别高于配对的癌旁组织(P<0.05)。2.plk1在肝细胞癌中高表达与p21蛋白关系不确定。3.p21蛋白在肝癌细胞系HepG2过表达并不能抑制plk1基因的转录和plk1蛋白表达。