稻瘟菌(Magnaporthe oryzae)是导致水稻产生稻瘟病的植物病原真菌。它也是研究植物病原真菌的重要模式真菌之一,除水稻外还能侵染多种禾本科植物。已有的研究表明,由氮源缺乏造成的饥饿压力是稻瘟病菌在水稻组织内面临的主要环境胁迫之一。氮饥饿还可诱导稻瘟病菌产生致病性的分泌蛋白质。目前氮饥饿对稻瘟病菌菌丝体影响的分子机制还不清楚。本研究首先对全氮和缺氮培养条件下的强致病力菌株稻瘟病菌CH-63菌丝体中响应环境压力的抗氧化物酶活性变化进行比较,而后利用双向电泳及质谱技术比较和鉴定上述条件下表达量有差异的蛋白质。主要研究结果-如下:1、通过酶活测定发现,氮饥饿胁迫下菌丝体保护酶类(SOD、POD、CAT)的活性都在培养6h到9h期间上升较快,之后开始逐渐下降,MDA含量也在6h到12h内保持上升,之后逐渐下降。并且经氮胁迫处理的菌丝体保护酶类活性及MDA含量均高于对照,说明氮饥饿营养胁迫下稻瘟病菌菌丝体细胞膜受到一定伤害,但稻瘟菌对氮胁迫有很强的适应性,可以在短期内通过调节抗氧化酶活性达到新的平衡加以应对。2、通过对蛋白样品提取方法的优化、胶条合适范围的选择、上样量最佳值的调整等,建立了适用于稻瘟菌菌丝体双向电泳的实验方法。利用该方法构建了菌丝体蛋白的二维凝胶电泳图谱,该图谱各点分离清晰,染色效果好,可以更好地满足后续的质谱鉴定的要求。3、稻瘟病菌CH-63在含氮培养与缺氮条件下分别检测到平均975±70个蛋白点和1169±90个蛋白点,通过软件分析后得到了 49个上调或下调的差异蛋白点,并对其中43个点进行了质谱鉴定,其中37个有功能描述,6个功能未知,MALDI-TOF-MS初步鉴定和数据库检索分析后发现这些差异蛋白主要参与了菌丝体的发育、代谢、、生物合成、生物学等过程。说明稻瘟菌在氮饥饿营养胁迫下的的调控可能是一个比较复杂的多蛋白和酶参与的过程。