阿特拉津是一种三嗪类农药,莎稗磷是一种有机磷农药,两者均用于抑制农田中杂草的生长,然而农药的不恰当使用产生了农药残留问题,进而对环境及农作物安全甚至人类的健康产生了危害。本实验建立了一种免疫分离结合表面增强拉曼光谱检测环境及谷物中的农药残留的新方法。实验以树枝状纳米银作为拉曼增强基底,以三聚氰胺作为拉曼信号物,标记半抗原。建立了竞争性免疫反应结合表面增强拉曼光谱检测环境及谷物中的农药残留。通过多次实验得到拉曼光谱的最佳扫描参数:扫描时间为10s,扫描次数为3次,激光功率为0.5%-5%。抗体的稀释倍数为10倍稀释,标记半抗原的稀释倍数为100倍稀释,孵育时间为25分钟,PBST缓冲液的洗脱次数为2次。实验选取阿特拉津和莎稗磷两种目标物,以0.01ng/mL-100μg/mL浓度梯度为横坐标,以三聚氰胺信号峰强度为纵坐标,建立标准曲线。得到阿特拉津的标准曲线方程为 y=-4871.6x+17999,R2=0.9705,莎稗磷的标准曲线方程为 y=-7079.3x+26571,R2=0.9688。两种目标物的方法检出限均为0.01ng/mL。通过本实验建立的免疫分离结合表面增强拉曼光谱检测环境及谷物中的两种农残所需检测时间短,且灵敏度高,特异性好,对于实际样品的加标回收率较高,适合多种农药残留的定量检测。