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目的胃癌是最常见的肿瘤之一,中国的胃癌发病率和病死率尤高,因此针对胃癌的机制研究尤为迫切。Tribbles同源物3是一类假性蛋白激酶,在人体内参与调控多条信号通路,从而介导了多种疾病的发生发展,在糖尿病、冠心病、肥胖、阿尔兹海默症等疾病中发挥着重要作用。国内外学者均发现,TRIB3被发现在多种肿瘤中高表达,且导致了肿瘤的增殖、侵袭和转移。而TRIB3在胃癌中的作用研究匮乏,本课题针对TRIB3在胃癌中的作用进行研究。拟明确TRIB3在胃癌细胞中的相互作用蛋白、参与调控的信号通路及发挥的主要功能,并探讨TRIB3与胃癌患者临床、病理特点的关系。材料与方法1.生物信息学分析:Link Omics在线数据库中有415个胃癌标本,每个标本均有完善的临床病理数据,均来源于TCGA数据库。利用生物信息学分析方法探求TRIB3在胃癌细胞中的相关蛋白,并进行GO分析和KEGG分析。最后将TRIB3与胃癌临床数据进行相关性分析。2.免疫组化:本课题收集了60例胃腺癌组织标本及对应的癌旁组织标本,标本均来源于青岛大学附属医院。进行了区域目标的筛选后,制作了组织芯片蜡块。组织芯片蜡块切片后制作成组织芯片,采用免疫组化的方法检测了胃癌细胞及癌旁组织中TRIB3的表达。结果1.生信分析结果:(1)在胃癌细胞中,TRIB3有12386个相关蛋白(P<0.05)。其中表达正相关的基因有5987个,如C20orf20(p=3.21-E42),UBE2C(p=7.62-E41);表达负相关的基因有6399个,如PDE4D(p=7.73E-34),FAM13B(p=1.61E-32)。(2)GO分析以明确TRIB3在胃癌细胞中的功能,结果示:TRIB3与NF-k B结合功能、与t RNA结合功能等有正相关,与β-catenin结合功能、与细胞因子结合功能等有明显的负相关。(3)利用KEGG分析探求TRIB3在胃癌细胞中调控的信号通路,我们看到TRIB3主要与碱基的切除修复、细胞周期、类固醇生物合成等通路密切相关。(4)TRIB3表达越高的患者,其局部分期(T分期)越高。年龄越大的胃癌患者,TRIB3的表达越高。不同人种中TRIB3的表达亦不相同,黑种人TRIB3的表达与胃癌发病相关性最高,黄色人种次之,白种人最低。2.免疫组化的结果:(1)研究中60例胃癌标本中TRIB3的阳性表率为46.7%(28/60),而癌旁组织中TRIB3的阳性表达率为20%(12/60),TRIB3在癌组织中的表达明高于在癌旁组织中的表达(P=0.002)。(2)将TRIB3的表达与临床病理相关因素的分析结果:TRIB3的表达与胃癌的TNM分期与远处转移密切相关(P<0.05),而与年龄、性别、肿瘤大小、分化程度无明显相关性(P>0.05)。结论 生物信息分析发现TRIB3在胃癌细胞中有多个相关蛋白,参与调控多条信号通路,T分期越高的患者TRIB3的表达越高。我们进行免疫组化发现,TRIB3与胃癌TNM分期及远处转移有相关性,而TNM分期指导患者治疗策略,预测患者预后及生存时间。TRIB3可能是评价胃癌生物学行为的有效指标,或能指导胃癌的治疗及预测疗效。