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大量的实验证明,褪黑素在机体炎症疾病的发病过程中发挥重要的免疫调控作用,但其在由幽门螺杆菌引起的胃部疾病免疫调节过程中发挥的作用和机制尚不清楚。本研究通过建立由H.pylori感染获得胃疾病的小鼠模型,采用ELISA、HE染色、免疫组化、Western Blot等技术探讨经过25mg/kg、50mg/kg、100mg/kg不同浓度褪黑素干预2、4、6周后,小鼠褪黑素受体MT1、MT2、RORβ及TGFβ1、Foxp3含量的变化,探讨褪黑素对幽门螺杆菌相关胃疾病的免疫调节机制。方法1.运用HE染色法检测小鼠胃组织的病理变化。2.运用免疫组化技术检测小鼠胃组织中褪黑素受体MT1、MT2表达的变化。3.运用ELISA试剂盒定量检测分析褪黑素干预后H.pylori感染相关胃炎模型小鼠血浆中TGFβ1含量的变化。4.运用Western Blot技术检测小鼠脾、胃组织中Foxp3、TGFβ1、RORβ蛋白表达的变化。结果1.石蜡切片HE染色显示:幽门螺杆菌模型小鼠胃黏膜层和黏膜下层存在明显的炎症细胞,呈弥散性分布,且小鼠胃组织匀浆涂板培养后,快速尿素酶实验检验阳性,表明造模成功。2.免疫组化结果显示:在幽门螺杆菌模型小鼠胃黏膜层可看到MT1、MT2均有大量且广泛的表达。3.ELISA结果显示:褪黑素干预2周后的H.pylori模型小鼠肝脏TGFβ1与正常组比下调,差异有统计学意义。褪黑素干预4、6周后的H.pylori模型小鼠TGFβ1含量与空白对照组比上调,差异有统计学意义。4.Western Blot结果显示:Foxp3表达量变化:2周时褪黑素干预各剂量组小鼠脾组织中Foxp3表达量显著下调,4周时50mg/kg、100mg/kg剂量组Foxp3表达量上调,差异有统计学意义,6周时所有褪黑素处理组小鼠Foxp3表达量的值均趋近于正常组表达量。RORβ表达量变化:2周时褪黑素干预各剂量组小鼠胃组织中RORβ表达量显著下调,4周时褪黑素干预各剂量组小鼠RORβ表达量上调,6周时25mg/kg剂量组小鼠RORβ表达量上调,差异均有统计学意义。TGFβ1表达量变化:2、4、6周时所有褪黑素处理组小鼠肝脏组织中TGFβ1表达量均上调,差异有统计学意义。结论褪黑素可能通过调节TGFβ1、Foxp3,借助于膜受体和核受体途径,起到缓解H.pylori所致小鼠胃疾病的作用。