论文部分内容阅读
目的:随着社会文明不断进步,口腔护理也逐渐得到人们的重视,其中牙列的缺损和牙齿的缺失是导致口腔健康和功能受到影响的因素之一。由于人们要求的不断提高,常规传统的牙齿修复方式已经不能达到患者的要求。在骨结合理论的成熟的背景下,口腔种植来修复牙齿缺失和牙列缺损的技术不但得到了飞速的发展,而且也逐渐被歡们所接受。但也带来了很多相关的问题,比如并不是所有患者都适合种植牙的修复,其中骨质疏松是影响种植牙成功的一个重要因素之一。特别是绝经后的女性,已被证实由于雌激素水平的变化,会导致骨质疏松的发生,从而在临床上影响这部分女性种植修复后的成功率。亚麻木酚素(SDG),在预防和诊治女性由于绝经后导致的骨质疏松的临床疗效已经被证实,能够提高患者血清钙的含量和体内骨量,提高骨对甲状腺旁腺激素的敏感程度,促进形成新的骨基质,对克制骨质的流失有显著的效果。亚麻木酚素作为植物雌性激素的一种,与人体雌性激素具有较高相似程度,由亚麻籽中提炼所得,通常约占籽份量的0.9%～1.5%。本实验用亚麻木酚素体外培养成骨细胞,来探查并分析其对成骨细胞相关基因的表达量、增殖以及分化的影响。方法:采用亚麻木酚素培养液体外培养成骨细胞,观察评价亚麻木酚素对成骨细胞的增殖、分化以及护骨素(OPG)基因的表达量的影响。本实验首先利用已配置好,含有不同浓度梯度的亚麻木酚素培养液培养相同数目的成骨细胞,在特定时间点,利用MTT比色法观察细胞的粘附和增殖;采用ALP活性检测法分析说明成骨细胞的分化情况;利用RT-qPCR技术检测护骨素的基因表达情况。结果:1、MTT检测显示,利用不同浓度梯度的亚麻木酚素(SDG)培养液分别培养成骨细胞1天、2天、3天,与空白组相对比结果显示:Id和2d时间点时,在SDG浓度是10-5 moI/L的培养液中的成骨细胞增殖受到克制,P<0.05,于3d时间点检测数据显示,P>0.05;SDG浓度是10-6mo/L与10-9moL/L培养液中,成骨细胞变化均不显著,P>0.05;SDG浓度是10-7moL/L和10-8moL/L培养液中的成骨细胞均增殖,上调趋势显著,其中成骨细胞在SDG浓度是10-7moL/L培养液中增殖最明显,差异具有统计学意义,P<0.05。2、碱性磷酸酶(ALP)活性测定显示,SDG浓度是10-7moL/L与10-8moL/L培液中,ALP较空白组活性高,P<0.05,尤其SDG浓度是10-7moL/L时培养液中ALP活性最高;SDG浓度是10-5moL/L培养液中,较空白组相对比ALP活性明显下降,P<0.05;SDG浓度是10-6moL/L与10-9moL/L培养液中,ALP活性无明显变化,无统计学意义,P>0.05。3、RT-qPCR检测3天时间点的护骨素的基因表达情况,与空白对照比较结果显示,SDG浓度是10-5 moI/L时,护骨素表达量呈下调趋势,但差异无统计学意义,P>0.05;SDG浓度是10-8moL/L和10-9moL/L时,呈上调趋势,也无统计学意义,P>0.05;SDG浓度是10-6moL/L、10-7moL/L时,OPG的基因表达量增长趋势明显,P<0.05。结论:利用亚麻木酚素配成不同浓度梯度的培养液体外培养成骨细胞,高浓度亚麻木酚素培养液(10-5moL/L)对细胞具有抑制效果;低浓度(10-6moL/L、10-7moL/L、10-8moL/L)亚麻木酚素培养液时,成骨细胞增殖率均成上调趋势以及OPG基因表达量提高,特别是在亚麻木酚素浓度是10-7moI/L时,成骨细胞增殖和OPG基因表达量提高较明显;药物浓度是10-9moL/L时,可能由于浓度过低,故作用不明显。说明SDG在成骨细胞增殖、分化的促进上具有一定效果。